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- Xybio
- 上海
- P1993
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pDsRed2-1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pDsRed2-1哺乳启动子检测质粒
别称: pDsRed2-1
| 复制子: | pUC |
|---|---|
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 启动子检测 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | Promoter |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： | 红色 |
质粒简介
pDsRed2-1质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3300/pCMV-SPORT6-CFDP1（2同义突变）人源基因质粒 |
| P3301/pCMV-SPORT6-GAR1(2同义突变）人源基因质粒 |
| P3302/pCMV-SPORT6-PSMB6人源基因质粒 |
| P3303/pCMV-SPORT6-RBM26人源基因质粒 |
| P3304/pCMV-SPORT6-PARK7(1同义突变）人源基因质粒 |
| P3305/pCMV-SPORT6-PIGS（907-1668）人源基因质粒 |
| P3306/pCMV-SPORT6-TMUB1人源基因质粒 |
| P3307/pCMV-SPORT6-PITX1（1点突变）人源基因质粒 |
| P3308/pCMV-SPORT6-RAD18（1点突变）人源基因质粒 |
| P3309/pCMV-SPORT6-SSX1(1同义突变）人源基因质粒 |
| P3310/pCMV-SPORT6-PDIA6人源基因质粒 |
| P3311/pCMV-SPORT6-SEPT8（358-1284）人源基因质粒 |
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文献和实验GENETICS：用于检测哺乳动物细胞中 DNA-蛋白质交联质粒修复的简单、快速的定量分析
该方法的目的是提供灵活，快速和定量的技术来检测哺乳动物细胞系中DNA-蛋白质交联（DPC）修复的动力学。该测定不是全局测定异种生物诱导的或自发的染色体DPC去除的去除，而是检查在质粒DNA底物内的一个位点处特异性引入的均匀的，化学定义的损伤的修复。这种方法避免了放射性物质的使用，并且不依赖昂贵的或高度专业化的技术。相反，它依赖于标准的重组DNA程序和广泛可用的实时定量聚合酶链式反应（qPCR）仪器。考虑到所用策略的固有灵活性，可以改变交联蛋白的大小以及化学连接的性质和连接位点的精确 DNA
1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
。这两种方法的优点在于不需要直接操作RNA。4. siRNA表达载体多数的siRNA表达载体依赖3种RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹siRNA在哺乳动物细胞中的表达(1–4)。这3类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol III启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表达更多的小分子RNA，而且它是通过添加一串（3到6个）U来终止转录的。要使用这类载体，需要订购2段编码短发夹RNA序列的DNA单链，退火，克隆到相应载体的pol
