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- 2025年07月13日
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- 技术资料
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pRL-SV40
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pRL-SV40哺乳报告质粒
别称: pRL-SV40
质粒属性
质粒简介
The pRL-SV40 Vector may be used in combination with any experimental reporter vector to cotransfect mammalian cells. However, it is important to realize that trans effects between promoters on cotransfected plasmids can potentially affect reporter gene expression. This is primarily of concern when either the control or experimental reporter vector, or both, contain very strong promoter/enhancer elements. The occurrence and magnitude of such effects will depend on several factors: i) the combination and activities of the genetic regulatory elements present on the cotransfected vectors, ii) the relative ratio of experimental vector to control vector introduced into the cells, and iii) the cell type transfected.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 3705 bp ds-DNA circular SYN 01-4-2015
DEFINITION .
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3705)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-4-1 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3705
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 62..419
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 270..405
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
intron 489..621
/note="chimeric intron"
/note="chimera between introns from human?beta-globin and
immunoglobulin heavy chain genes"
promoter 666..684
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
polyA_signal 1660..1781
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
promoter 1914..2018
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 2019..2879
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3050..3638
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agatctgcgc agcaccatgg cctgaaataa cctctgaaag aggaacttgg ttaggtacct
61 tctgaggcgg aaagaaccag ctgtggaatg tgtgtcagtt agggtgtgga aagtccccag
121 gctccccagc aggcagaagt atgcaaagca tgcatctcaa ttagtcagca accaggtgtg
181 gaaagtcccc aggctcccca gcaggcagaa gtatgcaaag catgcatctc aattagtcag
241 caaccatagt cccgccccta actccgccca tcccgcccct aactccgccc agttccgccc
301 attctccgcc ccatggctga ctaatttttt ttatttatgc agaggccgag gccgcctcgg
361 cctctgagct attccagaag tagtgaggag gcttttttgg aggcctaggc ttttgcaaaa
421 agcttgattc ttctgacaca acagtctcga acttaagctg cagaagttgg tcgtgaggca
481 ctgggcaggt aagtatcaag gttacaagac aggtttaagg agaccaatag aaactgggct
541 tgtcgagaca gagaagactc ttgcgtttct gataggcacc tattggtctt actgacatcc
601 actttgcctt tctctccaca ggtgtccact cccagttcaa ttacagctct taaggctaga
661 gtacttaata cgactcacta taggctagcc accatgactt cgaaagttta tgatccagaa
721 caaaggaaac ggatgataac tggtccgcag tggtgggcca gatgtaaaca aatgaatgtt
781 cttgattcat ttattaatta ttatgattca gaaaaacatg cagaaaatgc tgttattttt
841 ttacatggta acgcggcctc ttcttattta tggcgacatg ttgtgccaca tattgagcca
901 gtagcgcggt gtattatacc agaccttatt ggtatgggca aatcaggcaa atctggtaat
961 ggttcttata ggttacttga tcattacaaa tatcttactg catggtttga acttcttaat
1021 ttaccaaaga agatcatttt tgtcggccat gattggggtg cttgtttggc atttcattat
1081 agctatgagc atcaagataa gatcaaagca atagttcacg ctgaaagtgt agtagatgtg
1141 attgaatcat gggatgaatg gcctgatatt gaagaagata ttgcgttgat caaatctgaa
1201 gaaggagaaa aaatggtttt ggagaataac ttcttcgtgg aaaccatgtt gccatcaaaa
1261 atcatgagaa agttagaacc agaagaattt gcagcatatc ttgaaccatt caaagagaaa
1321 ggtgaagttc gtcgtccaac attatcatgg cctcgtgaaa tcccgttagt aaaaggtggt
1381 aaacctgacg ttgtacaaat tgttaggaat tataatgctt atctacgtgc aagtgatgat
1441 ttaccaaaaa tgtttattga atcggaccca ggattctttt ccaatgctat tgttgaaggt
1501 gccaagaagt ttcctaatac tgaatttgtc aaagtaaaag gtcttcattt ttcgcaagaa
1561 gatgcacctg atgaaatggg aaaatatatc aaatcgttcg ttgagcgagt tctcaaaaat
1621 gaacaataat tctagagcgg ccgcttcgag cagacatgat aagatacatt gatgagtttg
1681 gacaaaccac aactagaatg cagtgaaaaa aatgctttat ttgtgaaatt tgtgatgcta
1741 ttgctttatt tgtaaccatt ataagctgca ataaacaagt taacaacaac aattgcattc
1801 attttatgtt tcaggttcag ggggaggtgt gggaggtttt ttaaagcaag taaaacctct
1861 acaaatgtgg taaaatcgat aaggatccag gtggcacttt tcggggaaat gtgcgcggaa
1921 cccctatttg tttatttttc taaatacatt caaatatgta tccgctcatg agacaataac
1981 cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat gagtattcaa catttccgtg
2041 tcgcccttat tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt ttttgctcac ccagaaacgc
2101 tggtgaaagt aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac atcgaactgg
2161 atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt ccaatgatga
2221 gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tattgacgcc gggcaagagc
2281 aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt tgagtactca ccagtcacag
2341 aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc ataaccatga
2401 gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag gagctaaccg
2461 cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa ccggagctga
2521 atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc tgtagcaatg gcaacaacgt
2581 tgcgcaaact attaactggc gaactactta ctctagcttc ccggcaacaa ttaatagact
2641 ggatggaggc ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc ggcccttccg gctggctggt
2701 ttattgctga taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt gcagcactgg
2761 ggccagatgg taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt caggcaacta
2821 tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc actgattaag cattggtaac
2881 tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt aaaacttcat ttttaattta
2941 aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct taacgtgagt
3001 tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt
3061 tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt
3121 gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc
3181 agataccaaa tactgttctt ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg
3241 tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg
3301 ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt
3361 cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac
3421 tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg
3481 acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg
3541 gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat
3601 ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt
3661 tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatggc tcgac
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pRL-SV40哺乳报告质粒
别称: pRL-SV40
| 启动子: | SV40 |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，信号通路报告载体 |
| 质粒大小: | 3705bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 信号报告 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： | rLuc |
质粒简介
The pRL-SV40 Vector may be used in combination with any experimental reporter vector to cotransfect mammalian cells. However, it is important to realize that trans effects between promoters on cotransfected plasmids can potentially affect reporter gene expression. This is primarily of concern when either the control or experimental reporter vector, or both, contain very strong promoter/enhancer elements. The occurrence and magnitude of such effects will depend on several factors: i) the combination and activities of the genetic regulatory elements present on the cotransfected vectors, ii) the relative ratio of experimental vector to control vector introduced into the cells, and iii) the cell type transfected.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 3705 bp ds-DNA circular SYN 01-4-2015
DEFINITION .
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3705)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-4-1 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3705
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 62..419
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 270..405
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
intron 489..621
/note="chimeric intron"
/note="chimera between introns from human?beta-globin and
immunoglobulin heavy chain genes"
promoter 666..684
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
polyA_signal 1660..1781
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
promoter 1914..2018
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 2019..2879
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3050..3638
/direction=RIGHT
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/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agatctgcgc agcaccatgg cctgaaataa cctctgaaag aggaacttgg ttaggtacct
61 tctgaggcgg aaagaaccag ctgtggaatg tgtgtcagtt agggtgtgga aagtccccag
121 gctccccagc aggcagaagt atgcaaagca tgcatctcaa ttagtcagca accaggtgtg
181 gaaagtcccc aggctcccca gcaggcagaa gtatgcaaag catgcatctc aattagtcag
241 caaccatagt cccgccccta actccgccca tcccgcccct aactccgccc agttccgccc
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361 cctctgagct attccagaag tagtgaggag gcttttttgg aggcctaggc ttttgcaaaa
421 agcttgattc ttctgacaca acagtctcga acttaagctg cagaagttgg tcgtgaggca
481 ctgggcaggt aagtatcaag gttacaagac aggtttaagg agaccaatag aaactgggct
541 tgtcgagaca gagaagactc ttgcgtttct gataggcacc tattggtctt actgacatcc
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721 caaaggaaac ggatgataac tggtccgcag tggtgggcca gatgtaaaca aatgaatgtt
781 cttgattcat ttattaatta ttatgattca gaaaaacatg cagaaaatgc tgttattttt
841 ttacatggta acgcggcctc ttcttattta tggcgacatg ttgtgccaca tattgagcca
901 gtagcgcggt gtattatacc agaccttatt ggtatgggca aatcaggcaa atctggtaat
961 ggttcttata ggttacttga tcattacaaa tatcttactg catggtttga acttcttaat
1021 ttaccaaaga agatcatttt tgtcggccat gattggggtg cttgtttggc atttcattat
1081 agctatgagc atcaagataa gatcaaagca atagttcacg ctgaaagtgt agtagatgtg
1141 attgaatcat gggatgaatg gcctgatatt gaagaagata ttgcgttgat caaatctgaa
1201 gaaggagaaa aaatggtttt ggagaataac ttcttcgtgg aaaccatgtt gccatcaaaa
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1441 ttaccaaaaa tgtttattga atcggaccca ggattctttt ccaatgctat tgttgaaggt
1501 gccaagaagt ttcctaatac tgaatttgtc aaagtaaaag gtcttcattt ttcgcaagaa
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1621 gaacaataat tctagagcgg ccgcttcgag cagacatgat aagatacatt gatgagtttg
1681 gacaaaccac aactagaatg cagtgaaaaa aatgctttat ttgtgaaatt tgtgatgcta
1741 ttgctttatt tgtaaccatt ataagctgca ataaacaagt taacaacaac aattgcattc
1801 attttatgtt tcaggttcag ggggaggtgt gggaggtttt ttaaagcaag taaaacctct
1861 acaaatgtgg taaaatcgat aaggatccag gtggcacttt tcggggaaat gtgcgcggaa
1921 cccctatttg tttatttttc taaatacatt caaatatgta tccgctcatg agacaataac
1981 cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat gagtattcaa catttccgtg
2041 tcgcccttat tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt ttttgctcac ccagaaacgc
2101 tggtgaaagt aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac atcgaactgg
2161 atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt ccaatgatga
2221 gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tattgacgcc gggcaagagc
2281 aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt tgagtactca ccagtcacag
2341 aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc ataaccatga
2401 gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag gagctaaccg
2461 cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa ccggagctga
2521 atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc tgtagcaatg gcaacaacgt
2581 tgcgcaaact attaactggc gaactactta ctctagcttc ccggcaacaa ttaatagact
2641 ggatggaggc ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc ggcccttccg gctggctggt
2701 ttattgctga taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt gcagcactgg
2761 ggccagatgg taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt caggcaacta
2821 tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc actgattaag cattggtaac
2881 tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt aaaacttcat ttttaattta
2941 aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct taacgtgagt
3001 tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt
3061 tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt
3121 gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc
3181 agataccaaa tactgttctt ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg
3241 tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg
3301 ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt
3361 cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac
3421 tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg
3481 acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg
3541 gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat
3601 ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt
3661 tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatggc tcgac
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4636/pCMV-SPORT6-TGFB3人源基因质粒 |
| P4637/pCMV-SPORT6-SGEF人源基因质粒 |
| P4638/pCMV-SPORT6-CCDC148（1点突变1同义突变）人源基因质粒 |
| P4639/pCMV-SPORT6-CSTF2人源基因质粒 |
| P4640/pCMV-SPORT6-ULK4人源基因质粒 |
| P4641/pCMV-SPORT6-IQCD人源基因质粒 |
| P4642/pCMV-SPORT6-TBL2（1-1309bp）人源基因质粒 |
| P4643/pCMV-SPORT6-P-CP4人源基因质粒 |
| P4644/pCMV-SPORT6-ANKRD9人源基因质粒 |
| P4645/pCMV-SPORT6-AK3人源基因质粒 |
| P4646/pCMV-SPORT6-GABPB1人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
萤火虫荧光素酶反应的残留发光，小于未湮灭反应值的0.0004%。图6 用PLB裂解哺乳细胞的高效率和被动或主动裂解方法。用pGL3-Control 和pRL-SV40载体DNA共转染图示的培养哺乳细胞，制备裂解液时，向贴壁细胞加入PLB，温和摇动培养液达15分钟 （被动细胞裂解），或从培养板中刮下贴壁细胞，在-80℃进行1次冻/融循环（主动细胞裂解）。萤火虫和Renilla荧光素酶活力用DLR方法确定，如图4所示。为了便于比较，报告基因活力用主动裂解方法对每种细胞进行归一化。图A:萤火
水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒，用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3（promega）中。 另外，promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer，该选择哪个？ 水仙子2005 继续求助 sxd5266 pGL3-basic 没有SV40
3basic amp PGL3-control PGL3control amp PGL3-enhancer amp PGL3-promoter amp pRL-TK pRLTK amp pRL-CMV pRLCMV amp pRL-SV40 pRLSV40 amp pRL家族海肾荧光素酶(Rluc)对照报告基因载体系列是设计应用于双荧光素酶报告基因检测系统的。pRL载体提供组成性表达的海肾荧光素酶，可与一个萤火虫荧光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾荧
pRL-SV40哺乳报告质粒
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