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1克/10克/100克
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罗辅医药
- 英文名:
DMPG, Na
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文献和实验做实验前要先学会冻存,以备自己在后面的实验中能保持同一来源、稳定可靠的细胞,且可减少污染或其它不利影响。1、影响冻存细胞活性的因素(1)细胞冻存保护剂:常用的有二甲基亚砜(DMSO)和甘油,常用的浓度为5%-10%(90%小牛血清)。DMSO对二倍体细胞的毒性较甘油小。(2)细胞悬液的冻结速度:慢冻时冰冻在细胞外形成,因此不致损害细胞。多数细胞以每分钟下降1℃的速度,降至-20℃冻结。均可获得满意效果。(3)保存温度:液氮罐,可达到-196℃,此时所有的物理化学活动均降至最低限度,以保证细胞
酯在碱性水溶液中水解而生成盐和醇,这种反应叫皂化。油脂(高级脂肪酸的甘油酯)跟氢氧化钠溶液共热,生成肥皂(高级脂肪酸钠盐)和甘油。所以通常把酯的碱性水解反应叫皂化。酯的碱性水解历程如下: 在上述三步反应中,最后一步实际上是不可逆的,所以酯的碱性水解能趋于完成。
铵1分钟; (8)流水洗; (9)干燥后梯度乙醇脱水,二甲苯透明; (10)甘油明胶封固。 3.结果 酶活性处显示黑棕色。 4.对照实验 ①用β―甘油磷酸钠代替ATP钠盐应为阴性;②孵育液中加入ι―四咪唑抑制碱性磷酸酶排除假阳性;③去底物。 5.注意事项 此法要求Ca:―浓度在孵育前后不能降低,否则产生的磷酸根离子不能被完全捕获而影响准确定位。如染色效果不好可在孵育前将切片放入1%CaCl2 溶液中,37℃作用5分钟。
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