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- Xybio
- 上海
- P1872
- 2025年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#54587
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pmCitrine-C1哺乳荧光质粒
别称: Plasmid#54587
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： | 黄色 |
质粒简介
pmCitrine-C1质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3258/pENTR223-BUB3人源基因质粒 |
| P3259/pENTR223-MELTF(1同义突变）人源基因质粒 |
| P3260/pENTR223-HAGHL人源基因质粒 |
| P3261/pENTR223-FAM49B人源基因质粒 |
| P3262/pENTR223-PRKAG1(1点突变）人源基因质粒 |
| P3263/pENTR223-COPE(2同义突变）人源基因质粒 |
| P3264/pENTR223-RIMS3(1点突变）人源基因质粒 |
| P3265/pENTR223-GPN3(1点突变）人源基因质粒 |
| P3266/pENTR223-DDRGK1人源基因质粒 |
| P3267/pENTR223-FSTL1人源基因质粒 |
| P3268/pENTR223-POLA2人源基因质粒 |
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文献和实验是由IRES序列行使功能的，但要注意的是，这部分的翻译水平比较低，比前面的MCSA大概低一个数量级。所以要选择好两个蛋白的各自位置。 3)、哺乳动物/真核荧光载体 pEGFP-N1 pEGFPN1 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pEGFP-N3 pEGFPN3 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pEGFP-C1
哺乳动物的肾脏包含数千个肾单位，互相连接成为高度分枝化的集气管(collecting duct, CD)系统。肾脏主要由两个胚胎细胞群的相互作用形成：上皮性输尿管芽(Ureteric bud，UB)和周围的后肾间质(Metanephric mesenchyme, MM)，其中 MM 包含肾单位前体细胞（Nephron progenitors, NPs）和基质前体细胞（Stromal progenitors, SPs）【1】。在 MM 细胞的诱导下，UB 逐渐发育并形成分枝。MM 细胞聚集在UB
第五节 蛋白激酶C 蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）是一类Ca 2+ 、磷脂依赖性的蛋白激酶，在跨膜信号传递过程中起着重要作用。PKC通过催化多种蛋白质上Ser/Thr磷酸化，调节多种细胞的代谢、生长、增殖和分化。 表 8-3 哺乳动物组织内的PKC亚类 亚 类 氨基酸残基 分子量（kDa） 激 活 剂 表达组织 A组：经典PKC
