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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
ptdTomato-C1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：ptdTomato-C1哺乳荧光质粒
别称: ptdTomato-C1
质粒属性
质粒简介
ptdTomato-C1质粒是一个哺乳细胞红色荧光过表达质粒，CMV启动子驱动tdTomato红色荧光蛋白和目的基因融合在一起表达。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5442 bp ds-DNA circular SYN 01-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS Untitled 8
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5442)
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5442
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 61..364
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
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/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
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/product="tandem dimeric (pseudo-monomeric) derivative of
DsRed (Shaner et al., 2004)"
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indicates direction of (+) strand synthesis"
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/note="SV40 promoter"
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(Geneticin(R))"
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polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"
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replication"
ORIGIN
1 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg
61 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt
121 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca
181 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc
241 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta
301 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac
361 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg
421 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg
481 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt
541 acggtgggag gtctatataa gcagagctgg tttagtgaac cgtcagatcc gctagcgcta
601 ccggtcgcca ccatggtgag caagggcgag gaggtcatca aagagttcat gcgcttcaag
661 gtgcgcatgg agggctccat gaacggccac gagttcgaga tcgagggcga gggcgagggc
721 cgcccctacg agggcaccca gaccgccaag ctgaaggtga ccaagggcgg ccccctgccc
781 ttcgcctggg acatcctgtc cccccagttc atgtacggct ccaaggcgta cgtgaagcac
841 cccgccgaca tccccgatta caagaagctg tccttccccg agggcttcaa gtgggagcgc
901 gtgatgaact tcgaggacgg cggtctggtg accgtgaccc aggactcctc cctgcaggac
961 ggcacgctga tctacaaggt gaagatgcgc ggcaccaact tcccccccga cggccccgta
1021 atgcagaaga agaccatggg ctgggaggcc tccaccgagc gcctgtaccc ccgcgacggc
1081 gtgctgaagg gcgagatcca ccaggccctg aagctgaagg acggcggcca ctacctggtg
1141 gagttcaaga ccatctacat ggccaagaag cccgtgcaac tgcccggcta ctactacgtg
1201 gacaccaagc tggacatcac ctcccacaac gaggactaca ccatcgtgga acagtacgag
1261 cgctccgagg gccgccacca cctgttcctg gggcatggca ccggcagcac cggcagcggc
1321 agctccggca ccgcctcctc cgaggacaac aacatggccg tcatcaaaga gttcatgcgc
1381 ttcaaggtgc gcatggaggg ctccatgaac ggccacgagt tcgagatcga gggcgagggc
1441 gagggccgcc cctacgaggg cacccagacc gccaagctga aggtgaccaa gggcggcccc
1501 ctgcccttcg cctgggacat cctgtccccc cagttcatgt acggctccaa ggcgtacgtg
1561 aagcaccccg ccgacatccc cgattacaag aagctgtcct tccccgaggg cttcaagtgg
1621 gagcgcgtga tgaacttcga ggacggcggt ctggtgaccg tgacccagga ctcctccctg
1681 caggacggca cgctgatcta caaggtgaag atgcgcggca ccaacttccc ccccgacggc
1741 cccgtaatgc agaagaagac catgggctgg gaggcctcca ccgagcgcct gtacccccgc
1801 gacggcgtgc tgaagggcga gatccaccag gccctgaagc tgaaggacgg cggccactac
1861 ctggtggagt tcaagaccat ctacatggcc aagaagcccg tgcaactgcc cggctactac
1921 tacgtggaca ccaagctgga catcacctcc cacaacgagg actacaccat cgtggaacag
1981 tacgagcgct ccgagggccg ccaccacctg ttcctgtacg gcatggacga gctgtacaag
2041 tccggactca gatctcgagc tcaagcttcg aattctgcag tcgacggtac cgcgggcccg
2101 ggatccaccg gatctagata actgatcata atcagccata ccacatttgt agaggtttta
2161 cttgctttaa aaaacctccc acacctcccc ctgaacctga aacataaaat gaatgcaatt
2221 gttgttgtta acttgtttat tgcagcttat aatggttaca aataaagcaa tagcatcaca
2281 aatttcacaa ataaagcatt tttttcactg cattctagtt gtggtttgtc caaactcatc
2341 aatgtatctt aacgcgtaaa ttgtaagcgt taatattttg ttaaaattcg cgttaaattt
2401 ttgttaaatc agctcatttt ttaaccaata ggccgaaatc ggcaaaatcc cttataaatc
2461 aaaagaatag accgagatag ggttgagtgt tgttccagtt tggaacaaga gtccactatt
2521 aaagaacgtg gactccaacg tcaaagggcg aaaaaccgtc tatcagggcg atggcccact
2581 acgtgaacca tcaccctaat caagtttttt ggggtcgagg tgccgtaaag cactaaatcg
2641 gaaccctaaa gggagccccc gatttagagc ttgacgggga aagccggcga acgtggcgag
2701 aaaggaaggg aagaaagcga aaggagcggg cgctagggcg ctggcaagtg tagcggtcac
2761 gctgcgcgta accaccacac ccgccgcgct taatgcgccg ctacagggcg cgtcaggtgg
2821 cacttttcgg ggaaatgtgc gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa
2881 tatgtatccg ctcatgagac aataaccctg ataaatgctt caataatatt gaaaaaggaa
2941 gagtcctgag gcggaaagaa ccagctgtgg aatgtgtgtc agttagggtg tggaaagtcc
3001 ccaggctccc cagcaggcag aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccagg
3061 tgtggaaagt ccccaggctc cccagcaggc agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag
3121 tcagcaacca tagtcccgcc cctaactccg cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc
3181 gcccattctc cgccccatgg ctgactaatt ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc
3241 tcggcctctg agctattcca gaagtagtga ggaggctttt ttggaggcct aggcttttgc
3301 aaagatcgat caagagacag gatgaggatc gtttcgcatg attgaacaag atggattgca
3361 cgcaggttct ccggccgctt gggtggagag gctattcggc tatgactggg cacaacagac
3421 aatcggctgc tctgatgccg ccgtgttccg gctgtcagcg caggggcgcc cggttctttt
3481 tgtcaagacc gacctgtccg gtgccctgaa tgaactgcaa gacgaggcag cgcggctatc
3541 gtggctggcc acgacgggcg ttccttgcgc agctgtgctc gacgttgtca ctgaagcggg
3601 aagggactgg ctgctattgg gcgaagtgcc ggggcaggat ctcctgtcat ctcaccttgc
3661 tcctgccgag aaagtatcca tcatggctga tgcaatgcgg cggctgcata cgcttgatcc
3721 ggctacctgc ccattcgacc accaagcgaa acatcgcatc gagcgagcac gtactcggat
3781 ggaagccggt cttgtcgatc aggatgatct ggacgaagag catcaggggc tcgcgccagc
3841 cgaactgttc gccaggctca aggcgagcat gcccgacggc gaggatctcg tcgtgaccca
3901 tggcgatgcc tgcttgccga atatcatggt ggaaaatggc cgcttttctg gattcatcga
3961 ctgtggccgg ctgggtgtgg cggaccgcta tcaggacata gcgttggcta cccgtgatat
4021 tgctgaagag cttggcggcg aatgggctga ccgcttcctc gtgctttacg gtatcgccgc
4081 tcccgattcg cagcgcatcg ccttctatcg ccttcttgac gagttcttct gagcgggact
4141 ctggggttcg aaatgaccga ccaagcgacg cccaacctgc catcacgaga tttcgattcc
4201 accgccgcct tctatgaaag gttgggcttc ggaatcgttt tccgggacgc cggctggatg
4261 atcctccagc gcggggatct catgctggag ttcttcgccc accctagggg gaggctaact
4321 gaaacacgga aggagacaat accggaagga acccgcgcta tgacggcaat aaaaagacag
4381 aataaaacgc acggtgttgg gtcgtttgtt cataaacgcg gggttcggtc ccagggctgg
4441 cactctgtcg ataccccacc gagaccccat tggggccaat acgcccgcgt ttcttccttt
4501 tccccacccc accccccaag ttcgggtgaa ggcccagggc tcgcagccaa cgtcggggcg
4561 gcaggccctg ccatagcctc aggttactca tatatacttt agattgattt aaaacttcat
4621 ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct
4681 taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct
4741 tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca
4801 gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc
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4921 aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct
4981 gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag
5041 gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc
5101 tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg
5161 agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg cacgagggag
5221 cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt
5281 gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac
5341 gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg
5401 ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgccatgc at
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：ptdTomato-C1哺乳荧光质粒
别称: ptdTomato-C1
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,f1 ori |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒大小: | 5442bp |
| 质粒标签: | N-tdTomato |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞293T |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | 根据序列设计引物 |
| 3'测序引物: | Sv40-polyA-R：GAAATTTGTGATGCTATTGC |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
ptdTomato-C1质粒是一个哺乳细胞红色荧光过表达质粒，CMV启动子驱动tdTomato红色荧光蛋白和目的基因融合在一起表达。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5442 bp ds-DNA circular SYN 01-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS Untitled 8
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5442)
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5442
/organism="synthetic DNA construct"
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/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
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promoter"
CDS 613..2040
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DsRed (Shaner et al., 2004)"
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replication"
ORIGIN
1 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg
61 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt
121 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca
181 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc
241 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta
301 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac
361 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg
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1201 gacaccaagc tggacatcac ctcccacaac gaggactaca ccatcgtgga acagtacgag
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1381 ttcaaggtgc gcatggaggg ctccatgaac ggccacgagt tcgagatcga gggcgagggc
1441 gagggccgcc cctacgaggg cacccagacc gccaagctga aggtgaccaa gggcggcccc
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1561 aagcaccccg ccgacatccc cgattacaag aagctgtcct tccccgaggg cttcaagtgg
1621 gagcgcgtga tgaacttcga ggacggcggt ctggtgaccg tgacccagga ctcctccctg
1681 caggacggca cgctgatcta caaggtgaag atgcgcggca ccaacttccc ccccgacggc
1741 cccgtaatgc agaagaagac catgggctgg gaggcctcca ccgagcgcct gtacccccgc
1801 gacggcgtgc tgaagggcga gatccaccag gccctgaagc tgaaggacgg cggccactac
1861 ctggtggagt tcaagaccat ctacatggcc aagaagcccg tgcaactgcc cggctactac
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1981 tacgagcgct ccgagggccg ccaccacctg ttcctgtacg gcatggacga gctgtacaag
2041 tccggactca gatctcgagc tcaagcttcg aattctgcag tcgacggtac cgcgggcccg
2101 ggatccaccg gatctagata actgatcata atcagccata ccacatttgt agaggtttta
2161 cttgctttaa aaaacctccc acacctcccc ctgaacctga aacataaaat gaatgcaatt
2221 gttgttgtta acttgtttat tgcagcttat aatggttaca aataaagcaa tagcatcaca
2281 aatttcacaa ataaagcatt tttttcactg cattctagtt gtggtttgtc caaactcatc
2341 aatgtatctt aacgcgtaaa ttgtaagcgt taatattttg ttaaaattcg cgttaaattt
2401 ttgttaaatc agctcatttt ttaaccaata ggccgaaatc ggcaaaatcc cttataaatc
2461 aaaagaatag accgagatag ggttgagtgt tgttccagtt tggaacaaga gtccactatt
2521 aaagaacgtg gactccaacg tcaaagggcg aaaaaccgtc tatcagggcg atggcccact
2581 acgtgaacca tcaccctaat caagtttttt ggggtcgagg tgccgtaaag cactaaatcg
2641 gaaccctaaa gggagccccc gatttagagc ttgacgggga aagccggcga acgtggcgag
2701 aaaggaaggg aagaaagcga aaggagcggg cgctagggcg ctggcaagtg tagcggtcac
2761 gctgcgcgta accaccacac ccgccgcgct taatgcgccg ctacagggcg cgtcaggtgg
2821 cacttttcgg ggaaatgtgc gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa
2881 tatgtatccg ctcatgagac aataaccctg ataaatgctt caataatatt gaaaaaggaa
2941 gagtcctgag gcggaaagaa ccagctgtgg aatgtgtgtc agttagggtg tggaaagtcc
3001 ccaggctccc cagcaggcag aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccagg
3061 tgtggaaagt ccccaggctc cccagcaggc agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag
3121 tcagcaacca tagtcccgcc cctaactccg cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc
3181 gcccattctc cgccccatgg ctgactaatt ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc
3241 tcggcctctg agctattcca gaagtagtga ggaggctttt ttggaggcct aggcttttgc
3301 aaagatcgat caagagacag gatgaggatc gtttcgcatg attgaacaag atggattgca
3361 cgcaggttct ccggccgctt gggtggagag gctattcggc tatgactggg cacaacagac
3421 aatcggctgc tctgatgccg ccgtgttccg gctgtcagcg caggggcgcc cggttctttt
3481 tgtcaagacc gacctgtccg gtgccctgaa tgaactgcaa gacgaggcag cgcggctatc
3541 gtggctggcc acgacgggcg ttccttgcgc agctgtgctc gacgttgtca ctgaagcggg
3601 aagggactgg ctgctattgg gcgaagtgcc ggggcaggat ctcctgtcat ctcaccttgc
3661 tcctgccgag aaagtatcca tcatggctga tgcaatgcgg cggctgcata cgcttgatcc
3721 ggctacctgc ccattcgacc accaagcgaa acatcgcatc gagcgagcac gtactcggat
3781 ggaagccggt cttgtcgatc aggatgatct ggacgaagag catcaggggc tcgcgccagc
3841 cgaactgttc gccaggctca aggcgagcat gcccgacggc gaggatctcg tcgtgaccca
3901 tggcgatgcc tgcttgccga atatcatggt ggaaaatggc cgcttttctg gattcatcga
3961 ctgtggccgg ctgggtgtgg cggaccgcta tcaggacata gcgttggcta cccgtgatat
4021 tgctgaagag cttggcggcg aatgggctga ccgcttcctc gtgctttacg gtatcgccgc
4081 tcccgattcg cagcgcatcg ccttctatcg ccttcttgac gagttcttct gagcgggact
4141 ctggggttcg aaatgaccga ccaagcgacg cccaacctgc catcacgaga tttcgattcc
4201 accgccgcct tctatgaaag gttgggcttc ggaatcgttt tccgggacgc cggctggatg
4261 atcctccagc gcggggatct catgctggag ttcttcgccc accctagggg gaggctaact
4321 gaaacacgga aggagacaat accggaagga acccgcgcta tgacggcaat aaaaagacag
4381 aataaaacgc acggtgttgg gtcgtttgtt cataaacgcg gggttcggtc ccagggctgg
4441 cactctgtcg ataccccacc gagaccccat tggggccaat acgcccgcgt ttcttccttt
4501 tccccacccc accccccaag ttcgggtgaa ggcccagggc tcgcagccaa cgtcggggcg
4561 gcaggccctg ccatagcctc aggttactca tatatacttt agattgattt aaaacttcat
4621 ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct
4681 taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct
4741 tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca
4801 gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc
4861 agcagagcgc agataccaaa tactgttctt ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc
4921 aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct
4981 gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag
5041 gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc
5101 tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg
5161 agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg cacgagggag
5221 cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt
5281 gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac
5341 gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg
5401 ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgccatgc at
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3226/pENTR223-CCDC42（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3227/pENTR223-DAZAP1人源基因质粒 |
| P3228/pENTR223-RNF5人源基因质粒 |
| P3229/pENTR223-AIF1L人源基因质粒 |
| P3230/pENTR223-S100A4人源基因质粒 |
| P3231/pENTR223-LSM3（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3232/pENTR223-ALG8-A1507G人源基因质粒 |
| P3233/pENTR223-IL32（2同义突变）人源基因质粒 |
| P3234/pENTR223-MRTO4（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3235/pENTR223-STK32C（1同义突变）人源基因质粒 |
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