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- Xybio
- 上海
- P1252
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pIRES2-AcGFP1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pIRES2-AcGFP1哺乳荧光质粒
别称: pIRES2-AcGFP1
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： | 绿色 |
质粒简介
pIRES2-AcGFP1质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2900/pENTR223-DCAF15（493-1803bp）人源基因质粒 |
| P2901/pENTR223-ASTN2-C1262T人源基因质粒 |
| P2902/pENTR223-SLC30A4人源基因质粒 |
| P2903/pENTR223-CLASP2人源基因质粒 |
| P2904/pENTR223-KLHDC3人源基因质粒 |
| P2905/pENTR223-KRR1-T617C人源基因质粒 |
| P2906/pENTR223-SEPT6-T1217C人源基因质粒 |
| P2907/pENTR223-COPS2人源基因质粒 |
| P2908/pENTR223-DNAJA4-A7（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2909/pENTR223-FAM53C人源基因质粒 |
| P2910/pENTR223-ANKMY1（240-1551bp）人源基因质粒 |
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文献和实验效率同时也提高了它在高等哺乳动物细胞中的表达水平。另外，AcGFP1蛋白很稳定，可以对它在长时间范围内进行荧光检测。这种载色体成熟的很迅速，转染后8-12小时就可以进行检测。因此AcGFP1可被用来实时检测蛋白质的转运。 ModulusTM 多功能检测仪可以检测到低至5pg/ul的重组AcGFP1。 2. 实验准备 ModulusTM 多功能检测仪 （P/N 9200-001 or 9200-002
2)、哺乳动物/真核表达载体 pcDNA3.1+ 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals pcDNA3.1- 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals pcDNA4/V5-His A, amp 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisA 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisB 含His标签
PYM30 ECGP PYM33 EBFP PYM39 EYFP pLVX-ShRNA1 pLVX-puro PLVX-ires-zsgreen1 PLVX-acgfp-n1 PLVX-dsred-monomer-n1
