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- Xybio
- 上海
- P2137
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#20927
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pEP4 E02S ET2K人源基因质粒
别称: Plasmid#20927
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pCDNA3.0-HA-p53质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3860/pCMV-SPORT6-ATP5F1A人源基因质粒 |
| P3861/pCMV-SPORT6-PGAP3人源基因质粒 |
| P3862/pCMV-SPORT6-GAK人源基因质粒 |
| P3863/pCMV-SPORT6-SLC46A1人源基因质粒 |
| P3864/pCMV-SPORT6-SLU7人源基因质粒 |
| P3865/pCMV-SPORT6-AHCYL1人源基因质粒 |
| P3866/pCMV-SPORT6-C15orf39(1同义突变）人源基因质粒 |
| P4882/pCMV-SPORT6-ACAA1（点突变）人源基因质粒 |
| P3867/pCMV-SPORT6-CBS（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3868/pCMV-SPORT6-VPS33A人源基因质粒 |
| P3869/pCMV-SPORT6-SLC38A1（1同义突变）人源基因质粒 |
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.A. (1991) J. Bacteriol., 173, 5220�5223. (6) Waite-Rees, P. et al. (1991) J. Bacteriol., 173, 5207�5219. (7) Raleigh, E.A. et al. (1988) Nucl. Acids Res., 16, 1563�1575. (8) Whittaker, P.A. et al. (1988) Nucl. Acids Res., 16, 6725�6736. (9) Woodcock, D
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
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