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- 上海
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#83914
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：mKO2-SLBP(18-126)人源基因质粒
别称: Plasmid#83914
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介：详询
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7426 bp ds-DNA circular SYN 27-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7426)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 27, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7426
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 63..366
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 368..566
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
LTR 584..764
/label=5' LTR (truncated)
/note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
misc_feature 811..936
/label=HIV-1 Psi
/note="packaging signal of human immunodeficiency virus
type 1"
misc_feature 1435..1668
/label=RRE
/note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for
Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the
cytoplasm."
misc_feature 2195..2312
/label=cPPT/CTS
/note="central polypurine tract and central termination
sequence of HIV-1"
promoter 2371..2684
/label=U6 promoter
/note="RNA polymerase III promoter for mouse U6 snRNA (Das
et al., 1988)"
protein_bind 2759..2792
/label=loxP
/bound_moiety="Cre recombinase"
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (GCATACAT)."
enhancer 2908..3211
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 3212..3415
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 3451..4485
/codon_start=1
/label=mKO2-SLBP(18-126)
/translation="MVSVIKPEMKMRYYMDGSVNGHEFTIEGEGTGRPYEGHQEMTLRV
TMAEGGPMPFAFDLVSHVFCYGHRVFTKYPEEIPDYFKQAFPEGLSWERSLEFEDGGSA
SVSAHISLRGNTFYHKSKFTGVNFPADGPIMQNQSVDWEPSTEKITASDGVLKGDVTMY
LKLEGGGNHKCQMKTTYKAAKEILEMPGDHYIGHRLVRKTEGNITEQVEDAVAHYSMLP
SLGGYPSHWRPLEASPPSPARWSLGRKRRADGRRWRPEDAEEAEHRGAERRPESFTTPE
GPKPRSRCSDWASAVEEDEMRTRVNKEMARYKRKLLINDFGRERKSSSGSSDSKESMST
VPAD"
protein_bind 4513..4546
/label=loxP
/bound_moiety="Cre recombinase"
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (GCATACAT)."
misc_feature 4602..5190
/label=WPRE
/note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional
regulatory element"
LTR 5432..5612
/label=5' LTR (truncated)
/note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
rep_origin complement(5674..6262)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(6433..7293)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
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EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(7294..7398)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 actagttatt aatagtaatc aattacgggg tcattagttc atagcccata tatggagttc
61 cgcgttacat aacttacggt aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca
121 ttgacgtcaa taatgacgta tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt
181 caatgggtgg agtatttacg gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg
241 ccaagtacgc cccctattga cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag
301 tacatgacct tatgggactt tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt
361 accatggtga tgcggttttg gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg
421 ggatttccaa gtctccaccc cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa
481 cgggactttc caaaatgtcg taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt
541 gtacggtggg aggtctatat aagcagcgcg ttttgcctgt actgggtctc tctggttaga
601 ccagatctga gcctgggagc tctctggcta actagggaac ccactgctta agcctcaata
661 aagcttgcct tgagtgcttc aagtagtgtg tgcccgtctg ttgtgtgact ctggtaacta
721 gagatccctc agaccctttt agtcagtgtg gaaaatctct agcagtggcg cccgaacagg
781 gacttgaaag cgaaagggaa accagaggag ctctctcgac gcaggactcg gcttgctgaa
841 gcgcgcacgg caagaggcga ggggcggcga ctggtgagta cgccaaaaat tttgactagc
901 ggaggctaga aggagagaga tgggtgcgag agcgtcagta ttaagcgggg gagaattaga
961 tcgcgatggg aaaaaattcg gttaaggcca gggggaaaga aaaaatataa attaaaacat
1021 atagtatggg caagcaggga gctagaacga ttcgcagtta atcctggcct gttagaaaca
1081 tcagaaggct gtagacaaat actgggacag ctacaaccat cccttcagac aggatcagaa
1141 gaacttagat cattatataa tacagtagca accctctatt gtgtgcatca aaggatagag
1201 ataaaagaca ccaaggaagc tttagacaag atagaggaag agcaaaacaa aagtaagacc
1261 accgcacagc aagcggccgg ccgcgctgat cttcagacct ggaggaggag atatgaggga
1321 caattggaga agtgaattat ataaatataa agtagtaaaa attgaaccat taggagtagc
1381 acccaccaag gcaaagagaa gagtggtgca gagagaaaaa agagcagtgg gaataggagc
1441 tttgttcctt gggttcttgg gagcagcagg aagcactatg ggcgcagcgt caatgacgct
1501 gacggtacag gccagacaat tattgtctgg tatagtgcag cagcagaaca atttgctgag
1561 ggctattgag gcgcaacagc atctgttgca actcacagtc tggggcatca agcagctcca
1621 ggcaagaatc ctggctgtgg aaagatacct aaaggatcaa cagctcctgg ggatttgggg
1681 ttgctctgga aaactcattt gcaccactgc tgtgccttgg aatgctagtt ggagtaataa
1741 atctctggaa cagatttgga atcacacgac ctggatggag tgggacagag aaattaacaa
1801 ttacacaagc ttaatacact ccttaattga agaatcgcaa aaccagcaag aaaagaatga
1861 acaagaatta ttggaattag ataaatgggc aagtttgtgg aattggttta acataacaaa
1921 ttggctgtgg tatataaaat tattcataat gatagtagga ggcttggtag gtttaagaat
1981 agtttttgct gtactttcta tagtgaatag agttaggcag ggatattcac cattatcgtt
2041 tcagacccac ctcccaaccc cgaggggacc cgacaggccc gaaggaatag aagaagaagg
2101 tggagagaga gacagagaca gatccattcg attagtgaac ggatcggcac tgcgtgcgcc
2161 aattctgcag acaaatggca gtattcatcc acaattttaa aagaaaaggg gggattgggg
2221 ggtacagtgc aggggaaaga atagtagaca taatagcaac agacatacaa actaaagaat
2281 tacaaaaaca aattacaaaa attcaaaatt ttcgggttta ttacagggac agcagagatc
2341 cagtttggtt agtaccgggc ccgctctaga gatccgacgc cgccatctct aggcccgcgc
2401 cggccccctc gcacagactt gtgggagaag ctcggctact cccctgcccc ggttaatttg
2461 catataatat ttcctagtaa ctatagaggc ttaatgtgcg ataaaagaca gataatctgt
2521 tctttttaat actagctaca ttttacatga taggcttgga tttctataag agatacaaat
2581 actaaattat tattttaaaa aacagcacaa aaggaaactc accctaactg taaagtaatt
2641 gtgtgttttg agactataaa tatcccttgg agaaaagcct tgttaacgcg cggtgaccct
2701 cgaggtcgac ggtatcgata agctcgcttc acgagattcc agcaggtcga gggacctaat
2761 aacttcgtat agcatacatt atacgaagtt atattaaggg ttccaagctt aagcggccgc
2821 gtggataacc gtattaccgc catgcattag ttattaatag taatcaatta cggggtcatt
2881 agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt tacataactt acggtaaatg gcccgcctgg
2941 ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg acgtatgttc ccatagtaac
3001 gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat ttacggtaaa ctgcccactt
3061 ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag tacgccccct attgacgtca atgacggtaa
3121 atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta cttggcagta
3181 catctacgta ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg ttttggcagt acatcaatgg
3241 gcgtggatag cggtttgact cacggggatt tccaagtctc caccccattg acgtcaatgg
3301 gagtttgttt tggcaccaaa atcaacggga ctttccaaaa tgtcgtaaca actccgcccc
3361 attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataagca gagctggttt
3421 agtgaaccgt cagatccgct agcaccaggt atggtgagcg tgatcaagcc cgagatgaag
3481 atgaggtact acatggacgg ctccgtcaat gggcatgagt tcacaatcga gggtgagggc
3541 acaggcagac cttacgaggg acatcaggag atgacactgc gcgtcacaat ggccgagggc
3601 gggccaatgc ctttcgcctt cgacctggtg tcccacgtgt tctgttacgg ccacagagtt
3661 tttaccaagt acccagaaga gatcccagac tatttcaagc aggcctttcc tgagggcctg
3721 tcctgggaga ggtccctgga gttcgaggac ggcggctccg cctccgtgag cgcccacatc
3781 agcctgaggg gcaacacctt ctaccacaag tccaagttca ccggcgtgaa cttccccgcc
3841 gacggcccca tcatgcagaa ccagagcgtg gactgggagc cctccaccga gaagatcacc
3901 gccagcgacg gcgtgctgaa gggcgacgtg accatgtacc tgaagctgga gggcggcggc
3961 aaccacaagt gccagatgaa gaccacctac aaggccgcca aggagatcct ggagatgccc
4021 ggcgaccact acatcggcca caggctggtg aggaagaccg agggcaacat caccgagcag
4081 gtggaggacg ccgtggccca ctactcaatg ttgccttccc tgggaggata cccatcacac
4141 tggcgaccac tcgaggccag cccgccgtcc cccgcgcgat ggagcctggg acggaagcgc
4201 agagccgacg gcaggcgctg gaggcccgaa gacgccgagg aggcagagca ccgcggcgcc
4261 gagcgcagac ccgagagctt taccactcct gaaggcccta aaccccgttc cagatgctct
4321 gactgggcaa gtgcagttga agaagatgaa atgaggacca gagttaacaa agaaatggca
4381 agatataaaa ggaaactcct catcaatgac tttggaagag agagaaaatc atcatcagga
4441 agttctgatt caaaggagtc tatgtctact gtgccggctg actaagttta aacgaattcg
4501 tcgagggacc taataacttc gtatagcata cattatacga agttatacat gtttaagggt
4561 tccggttcca ctaggtacaa ttcgatatca agcttatcga taatcaacct ctggattaca
4621 aaatttgtga aagattgact ggtattctta actatgttgc tccttttacg ctatgtggat
4681 acgctgcttt aatgcctttg tatcatgcta ttgcttcccg tatggctttc attttctcct
4741 ccttgtataa atcctggttg ctgtctcttt atgaggagtt gtggcccgtt gtcaggcaac
4801 gtggcgtggt gtgcactgtg tttgctgacg caacccccac tggttggggc attgccacca
4861 cctgtcagct cctttccggg actttcgctt tccccctccc tattgccacg gcggaactca
4921 tcgccgcctg ccttgcccgc tgctggacag gggctcggct gttgggcact gacaattccg
4981 tggtgttgtc ggggaaatca tcgtcctttc cttggctgct cgcctgtgtt gccacctgga
5041 ttctgcgcgg gacgtccttc tgctacgtcc cttcggccct caatccagcg gaccttcctt
5101 cccgcggcct gctgccggct ctgcggcctc ttccgcgtct tcgccttcgc cctcagacga
5161 gtcggatctc cctttgggcc gcctccccgc atcgataccg tcgacctcga tcgagaccta
5221 gaaaaacatg gagcaatcac aagtagcaat acagcagcta ccaatgctga ttgtgcctgg
5281 ctagaagcac aagaggagga ggaggtgggt tttccagtca cacctcaggt acctttaaga
5341 ccaatgactt acaaggcagc tgacgcgtga ttttaaaaga aaagggggga ctggaagggc
5401 taattcactc ccactgcttt ttgcctgtac tgggtctctc tggttagacc agatctgagc
5461 ctgggagctc tctggctaac tagggaaccc actgcttaag cctcaataaa gcttgccttg
5521 agtgcttcaa gtagtgtgtg cccgtctgtt gtgtgactct ggtaactaga gatccctcag
5581 acccttttag tcagtgtgga aaatctctag cagcatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc
5641 caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga
5701 gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata
5761 ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac
5821 cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg
5881 taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc
5941 cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag
6001 acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt
6061 aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaagaacagt
6121 atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg
6181 atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac
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6301 gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac
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6421 ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt
6481 tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt
6541 accatctggc cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt
6601 atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc
6661 cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa
6721 tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg
6781 tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt
6841 gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc
6901 agtgttatca ctcatggtta tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt
6961 aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg
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7081 tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc
7141 gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt
7201 tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg
7261 aataagggcg acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag
7321 catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa
7381 acaaataggg gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca cctgac
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：mKO2-SLBP(18-126)人源基因质粒
别称: Plasmid#83914
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介：详询
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7426 bp ds-DNA circular SYN 27-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7426)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 27, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7426
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 63..366
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 368..566
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/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
LTR 584..764
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/note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
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type 1"
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/note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for
Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the
cytoplasm."
misc_feature 2195..2312
/label=cPPT/CTS
/note="central polypurine tract and central termination
sequence of HIV-1"
promoter 2371..2684
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/note="RNA polymerase III promoter for mouse U6 snRNA (Das
et al., 1988)"
protein_bind 2759..2792
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/bound_moiety="Cre recombinase"
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (GCATACAT)."
enhancer 2908..3211
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 3212..3415
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 3451..4485
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/translation="MVSVIKPEMKMRYYMDGSVNGHEFTIEGEGTGRPYEGHQEMTLRV
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SLGGYPSHWRPLEASPPSPARWSLGRKRRADGRRWRPEDAEEAEHRGAERRPESFTTPE
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/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (GCATACAT)."
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/label=WPRE
/note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional
regulatory element"
LTR 5432..5612
/label=5' LTR (truncated)
/note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
rep_origin complement(5674..6262)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(6433..7293)
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/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
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/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
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LIKHW"
promoter complement(7294..7398)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 actagttatt aatagtaatc aattacgggg tcattagttc atagcccata tatggagttc
61 cgcgttacat aacttacggt aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca
121 ttgacgtcaa taatgacgta tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt
181 caatgggtgg agtatttacg gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg
241 ccaagtacgc cccctattga cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag
301 tacatgacct tatgggactt tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt
361 accatggtga tgcggttttg gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg
421 ggatttccaa gtctccaccc cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa
481 cgggactttc caaaatgtcg taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt
541 gtacggtggg aggtctatat aagcagcgcg ttttgcctgt actgggtctc tctggttaga
601 ccagatctga gcctgggagc tctctggcta actagggaac ccactgctta agcctcaata
661 aagcttgcct tgagtgcttc aagtagtgtg tgcccgtctg ttgtgtgact ctggtaacta
721 gagatccctc agaccctttt agtcagtgtg gaaaatctct agcagtggcg cccgaacagg
781 gacttgaaag cgaaagggaa accagaggag ctctctcgac gcaggactcg gcttgctgaa
841 gcgcgcacgg caagaggcga ggggcggcga ctggtgagta cgccaaaaat tttgactagc
901 ggaggctaga aggagagaga tgggtgcgag agcgtcagta ttaagcgggg gagaattaga
961 tcgcgatggg aaaaaattcg gttaaggcca gggggaaaga aaaaatataa attaaaacat
1021 atagtatggg caagcaggga gctagaacga ttcgcagtta atcctggcct gttagaaaca
1081 tcagaaggct gtagacaaat actgggacag ctacaaccat cccttcagac aggatcagaa
1141 gaacttagat cattatataa tacagtagca accctctatt gtgtgcatca aaggatagag
1201 ataaaagaca ccaaggaagc tttagacaag atagaggaag agcaaaacaa aagtaagacc
1261 accgcacagc aagcggccgg ccgcgctgat cttcagacct ggaggaggag atatgaggga
1321 caattggaga agtgaattat ataaatataa agtagtaaaa attgaaccat taggagtagc
1381 acccaccaag gcaaagagaa gagtggtgca gagagaaaaa agagcagtgg gaataggagc
1441 tttgttcctt gggttcttgg gagcagcagg aagcactatg ggcgcagcgt caatgacgct
1501 gacggtacag gccagacaat tattgtctgg tatagtgcag cagcagaaca atttgctgag
1561 ggctattgag gcgcaacagc atctgttgca actcacagtc tggggcatca agcagctcca
1621 ggcaagaatc ctggctgtgg aaagatacct aaaggatcaa cagctcctgg ggatttgggg
1681 ttgctctgga aaactcattt gcaccactgc tgtgccttgg aatgctagtt ggagtaataa
1741 atctctggaa cagatttgga atcacacgac ctggatggag tgggacagag aaattaacaa
1801 ttacacaagc ttaatacact ccttaattga agaatcgcaa aaccagcaag aaaagaatga
1861 acaagaatta ttggaattag ataaatgggc aagtttgtgg aattggttta acataacaaa
1921 ttggctgtgg tatataaaat tattcataat gatagtagga ggcttggtag gtttaagaat
1981 agtttttgct gtactttcta tagtgaatag agttaggcag ggatattcac cattatcgtt
2041 tcagacccac ctcccaaccc cgaggggacc cgacaggccc gaaggaatag aagaagaagg
2101 tggagagaga gacagagaca gatccattcg attagtgaac ggatcggcac tgcgtgcgcc
2161 aattctgcag acaaatggca gtattcatcc acaattttaa aagaaaaggg gggattgggg
2221 ggtacagtgc aggggaaaga atagtagaca taatagcaac agacatacaa actaaagaat
2281 tacaaaaaca aattacaaaa attcaaaatt ttcgggttta ttacagggac agcagagatc
2341 cagtttggtt agtaccgggc ccgctctaga gatccgacgc cgccatctct aggcccgcgc
2401 cggccccctc gcacagactt gtgggagaag ctcggctact cccctgcccc ggttaatttg
2461 catataatat ttcctagtaa ctatagaggc ttaatgtgcg ataaaagaca gataatctgt
2521 tctttttaat actagctaca ttttacatga taggcttgga tttctataag agatacaaat
2581 actaaattat tattttaaaa aacagcacaa aaggaaactc accctaactg taaagtaatt
2641 gtgtgttttg agactataaa tatcccttgg agaaaagcct tgttaacgcg cggtgaccct
2701 cgaggtcgac ggtatcgata agctcgcttc acgagattcc agcaggtcga gggacctaat
2761 aacttcgtat agcatacatt atacgaagtt atattaaggg ttccaagctt aagcggccgc
2821 gtggataacc gtattaccgc catgcattag ttattaatag taatcaatta cggggtcatt
2881 agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt tacataactt acggtaaatg gcccgcctgg
2941 ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg acgtatgttc ccatagtaac
3001 gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat ttacggtaaa ctgcccactt
3061 ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag tacgccccct attgacgtca atgacggtaa
3121 atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta cttggcagta
3181 catctacgta ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg ttttggcagt acatcaatgg
3241 gcgtggatag cggtttgact cacggggatt tccaagtctc caccccattg acgtcaatgg
3301 gagtttgttt tggcaccaaa atcaacggga ctttccaaaa tgtcgtaaca actccgcccc
3361 attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataagca gagctggttt
3421 agtgaaccgt cagatccgct agcaccaggt atggtgagcg tgatcaagcc cgagatgaag
3481 atgaggtact acatggacgg ctccgtcaat gggcatgagt tcacaatcga gggtgagggc
3541 acaggcagac cttacgaggg acatcaggag atgacactgc gcgtcacaat ggccgagggc
3601 gggccaatgc ctttcgcctt cgacctggtg tcccacgtgt tctgttacgg ccacagagtt
3661 tttaccaagt acccagaaga gatcccagac tatttcaagc aggcctttcc tgagggcctg
3721 tcctgggaga ggtccctgga gttcgaggac ggcggctccg cctccgtgag cgcccacatc
3781 agcctgaggg gcaacacctt ctaccacaag tccaagttca ccggcgtgaa cttccccgcc
3841 gacggcccca tcatgcagaa ccagagcgtg gactgggagc cctccaccga gaagatcacc
3901 gccagcgacg gcgtgctgaa gggcgacgtg accatgtacc tgaagctgga gggcggcggc
3961 aaccacaagt gccagatgaa gaccacctac aaggccgcca aggagatcct ggagatgccc
4021 ggcgaccact acatcggcca caggctggtg aggaagaccg agggcaacat caccgagcag
4081 gtggaggacg ccgtggccca ctactcaatg ttgccttccc tgggaggata cccatcacac
4141 tggcgaccac tcgaggccag cccgccgtcc cccgcgcgat ggagcctggg acggaagcgc
4201 agagccgacg gcaggcgctg gaggcccgaa gacgccgagg aggcagagca ccgcggcgcc
4261 gagcgcagac ccgagagctt taccactcct gaaggcccta aaccccgttc cagatgctct
4321 gactgggcaa gtgcagttga agaagatgaa atgaggacca gagttaacaa agaaatggca
4381 agatataaaa ggaaactcct catcaatgac tttggaagag agagaaaatc atcatcagga
4441 agttctgatt caaaggagtc tatgtctact gtgccggctg actaagttta aacgaattcg
4501 tcgagggacc taataacttc gtatagcata cattatacga agttatacat gtttaagggt
4561 tccggttcca ctaggtacaa ttcgatatca agcttatcga taatcaacct ctggattaca
4621 aaatttgtga aagattgact ggtattctta actatgttgc tccttttacg ctatgtggat
4681 acgctgcttt aatgcctttg tatcatgcta ttgcttcccg tatggctttc attttctcct
4741 ccttgtataa atcctggttg ctgtctcttt atgaggagtt gtggcccgtt gtcaggcaac
4801 gtggcgtggt gtgcactgtg tttgctgacg caacccccac tggttggggc attgccacca
4861 cctgtcagct cctttccggg actttcgctt tccccctccc tattgccacg gcggaactca
4921 tcgccgcctg ccttgcccgc tgctggacag gggctcggct gttgggcact gacaattccg
4981 tggtgttgtc ggggaaatca tcgtcctttc cttggctgct cgcctgtgtt gccacctgga
5041 ttctgcgcgg gacgtccttc tgctacgtcc cttcggccct caatccagcg gaccttcctt
5101 cccgcggcct gctgccggct ctgcggcctc ttccgcgtct tcgccttcgc cctcagacga
5161 gtcggatctc cctttgggcc gcctccccgc atcgataccg tcgacctcga tcgagaccta
5221 gaaaaacatg gagcaatcac aagtagcaat acagcagcta ccaatgctga ttgtgcctgg
5281 ctagaagcac aagaggagga ggaggtgggt tttccagtca cacctcaggt acctttaaga
5341 ccaatgactt acaaggcagc tgacgcgtga ttttaaaaga aaagggggga ctggaagggc
5401 taattcactc ccactgcttt ttgcctgtac tgggtctctc tggttagacc agatctgagc
5461 ctgggagctc tctggctaac tagggaaccc actgcttaag cctcaataaa gcttgccttg
5521 agtgcttcaa gtagtgtgtg cccgtctgtt gtgtgactct ggtaactaga gatccctcag
5581 acccttttag tcagtgtgga aaatctctag cagcatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc
5641 caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga
5701 gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata
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5821 cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg
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6181 atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac
6241 gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca
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6361 ctagatcctt ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac
6421 ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt
6481 tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt
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6601 atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc
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7201 tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg
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7321 catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa
7381 acaaataggg gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca cctgac
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1902/pCMV-HA-Parkin人源基因质粒 |
| P0806/pCDH-CMV-CAMK2G人源基因质粒 |
| P0848/pTT3-CD109-bio-His人源基因质粒 |
| P0849/p3×FLAG-DDX6(有突变)人源基因质粒 |
| P0850/pEGFP-C3-DDX6人源基因质粒 |
| P0851/pCMV-FLAG-DDX21人源基因质粒 |
| P0852/pCMV-CTSD人源基因质粒 |
| P1056/pCDNA6-FLAG-CBX7人源基因质粒 |
| P1057/pRK5-EGFP-Tau人源基因质粒 |
| P1069/pRK5-EGFP-Tau-P301L人源基因质粒 |
| P1058/pCAX APP Swe Ind人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC18 和 pUC19质粒图谱 pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ，是最常用的质粒载体，其结构组成紧凑，几乎不含多余的 DNA 片段，GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来，其中 lacZ (MSC)来自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱 。 这两个质粒的结构几乎是完全
zjf0709 左侧的是提取的PUC18质粒，中间的marker不太好（可以忽略），右侧的marker是DL2000，由于跑得时间过长所以marker跑散了，右侧DL2000最上面的一个条带是2000bp，PUC18的序列是2686bp，为什么会跑的比2000bp还快？这个现象正常吗？是不是超螺旋的问题？请大家帮忙解答，谢谢！！！ zjf0709 自己顶一下，请大家帮忙看一看。 济南基美
【求助】SIN18-pRLL-hEFIap-EGFP-WRPE
gtwyx 慢病毒包装质粒SIN18-pRLL-hEFIap-EGFP-WRPE，求图谱。 gtwyx-fd@163.com希望得到各位战友的帮助！ freecell Write to author for it. http://www.nature.com/mt/journal/v3/n1/abs/mt200115a.html gtwyx 谢谢楼上的战友。我想知道国内有没有
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