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pCIG-CNGA1-FLAG人源基因质粒

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  • ¥100 - 1000
  • Xybio
  • 上海
  • P1424
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      CNCG;CNG1;RP49;CNCG1;CNG-1;RCNC1;RCN

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pCIG-CNGA1-FLAG人源基因质粒
    别称: CNCG;CNG1;RP49;CNCG1;CNG-1;RCNC1;RCN
    启动子:CMV
    复制子: pUC
    终止子:  β-globin poly(A) signal
    质粒分类:  基因文库质粒;人源基因质粒;人源真核质粒
    质粒大小:8266bp
    质粒标签:绿色荧光蛋白EGFP,C-FLAG
    原核抗性: Amp
    筛选标记:无
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度
    表达宿主: 293T等哺乳细胞
    培养条件: 37℃,有氧,5%CO2
    诱导方式: 无需诱导,组成型表达
    5'测序引物: pCAGGS-F:GCTAACCATGTTCATGCCTTCT
    3'测序引物: IRES-R:CCTCACATTGCCAAAAGACG
    备注: GenBank: BC140399.1


    质粒属性
    载体宿主:哺乳细胞
    载体用途:蛋白表达
    基因种属:
    基因类型:ORF
    原核抗性:Amp
    真核抗性:
    荧光蛋白:绿色

    质粒简介
                  pCIG-CNGA1-FLAG质粒是在pCIG背景质粒的基础上,把CNGA1人源基因通过XhoI和EcoRI酶切位点克隆进入pCIG载体,CAG启动子驱动CNGA1人源基因和FLAG标签融合表达。pCIG-CNGA1-FLAG质粒由武汉淼灵生物科技有限公司分享至淼灵质粒平台。
    质粒图谱
    产品细节图片1

    质粒序列
    LOCUS       Exported                8266 bp ds-DNA     circular SYN 15-SEP-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 8266)
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported Sep 15, 2017 from MiaoLingPlasmid
                http://www.miaolingbio.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..8266
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         rep_origin      complement(42..630)
                         /direction=LEFT
                         /label=ori
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(801..1661)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /label=AmpR
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(1662..1766)
                         /gene="bla"
                         /label=AmpR promoter
         misc_feature    1797..3468
                         /label=CAG promoter
         enhancer        1797..2176
                         /label=CMV enhancer
                         /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
         promoter        2178..2455
                         /label=chicken beta-actin promoter
         intron          2456..3468
                         /label=chimeric intron
                         /note="chimera between introns from chicken beta-actin and 
                         rabbit beta-globin"
         CDS             3529..5625
                         /codon_start=1
                         /label=CNGA1
                         /translation="MKLSMKNNIINTQQSFVTMPNVIVPDIEKEIRRMENGACSSFSED
                         DDSASTSEESENENPHARGSFSYKSLRKGGPSQREQYLPGAIALFNVNNSSNKDQEPEE
                         KKKKKKEKKSKSDDKNE-NKNDPEKKKKKKDKEKKKKEEKSKDKKEEEKKEVVVIDPSGN
                         TYYNWLFCITLPVMYNWTMVIARACFDELQSDYLEYWLILDYVSDIVYLIDMFVRTRTG
                         YLEQGLLVKEELKLINKYKSNLQFKLDVLSLIPTDLLYFKLGWNYPEIRLNRLLRFSRM
                         FEFFQRTETRTNYPNIFRISNLVMYIVIIIHWNACVFYSISKAIGFGNDTWVYPDINDP
                         EFGRLARKYVYSLYWSTLTLTTIGETPPPVRDSEYVFVVVDFLIGVLIFATIVGNIGSM
                         ISNMNAARAEFQARIDAIKQYMHFRNVSKDMEKRVIKWFDYLWTNKKTVDEKEVLKYLP
                         DKLRAEIAINVHLDTLKKVRIFADCEAGLLVELVLKLQPQVYSPGDYICKKGDIGREMY
                         IIKEGKLAVVADDGVTQFVVLS-DGSYFGEISILNIKGSKAGNRRTANIKSIGYSDLFCL
                         SKDDLMEALTEYPDAKTMLEEKGKQILMKDGLLDLNIANAGSDPKDLEEKVTRMEGSVD
                         LLQTRFARILAEYESMQQKLKQRLTKVEKFLKPLIDTEFSSIEGPGAESGPIDSTDYKD
                         DDDK"
         misc_feature    5660..6238
                         /label=IRES2
                         /note="internal ribosome entry site (IRES) of the 
                         encephalomyocarditis virus (EMCV)"
         CDS             6239..6958
                         /codon_start=1
                         /product="enhanced GFP"
                         /label=EGFP
                         /note="mammalian codon-optimized"
                         /translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
                         KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
                         GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
                         VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL
                         EFVTAAGITLGMDELYK"
         polyA_site      7115..7170
                         /label=-beta-globin poly(A) signal
                         /note="rabbit beta-globin polyadenylation signal"
         promoter        7734..7929
                         /label=SV40 promoter
                         /note="SV40 early promoter"
         rep_origin      7780..7915
                         /label=SV40 ori
                         /note="SV40 origin of replication"
         polyA_signal    7935..8069
                         /label=SV40 poly(A) signal
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
    ORIGIN
            1 caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc
           61 cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta
          121 taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg
          181 ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc
          241 tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac
          301 gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac
          361 ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg
          421 aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga
          481 agnacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt
          541 agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag
          601 cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct
          661 gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgagatt atcaaaaagg
          721 atcttcacct agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta aagtatatat
          781 gagtaaactt ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat ctcagcgatc
          841 tgtctatttc gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg tgtagataac tacgatacgg
          901 gagggcttac catctggccc cagtgctgca atgataccgc gagacccacg ctcaccggct
          961 ccagatttat cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag tggtcctgca
         1021 actttatccg cctccatcca gtctattaat tgttgccggg aagctagagt aagtagttcg
         1081 ccagttaata gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag gcatcgtggt gtcacgctcg
         1141 tcgtttggta tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt tacatgatcc
         1201 cccatgttgt gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc cgatcgttgt cagaagtaag
         1261 ttggccgcag tgttatcact catggttatg gcagcactgc ataattctct tactgtcatg
         1321 ccatccgtaa gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt ctgagaatag
         1381 tgtatgcggc gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac cgcgccacat
         1441 agcagaactt taaaagtgct catcattgga aaacgttctt cggggcgaaa actctcaagg
         1501 atcttaccgc tgttgagatc cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa ctgatcttca
         1561 gcatctttta ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca aaatgccgca
         1621 aaaaagggaa taagggcgac acggaaatgt tgaatactca tactcttcct ttttcaatat
         1681 tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga atgtatttag
         1741 aaaaataaac aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc tgggtcgaca
         1801 ttgattattg actagttatt aatagtaatc aattacgggg tcattagttc atagcccata
         1861 tatggagttc cgcgttacat aacttacggt aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga
         1921 cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt
         1981 ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt
         2041 gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca
         2101 ttatgcccag tacatgacct tatgggactt tcctacttgg cagtacatct acgtattagt
         2161 catcgctatt accatggtcg aggtgagccc cacgttctgc ttcactctcc ccatctcccc
         2221 cccctcccca cccccaattt tgtatttatt tattttttaa ttattttgtg cagcgatggg
         2281 ggcggggggg gggggggggc gcgcgccagg cggggcgggg cggggcgagg ggcggggcgg
         2341 ggcgaggcgg agaggtgcgg cggcagccaa tcagagcggc gcgctccgaa agtttccttt
         2401 tatggcgagg cggcggcggc ggcggcccta taaaaagcga agcgcgcggc gggcgggagt
         2461 cgctgcgttg ccttcgcccc gtgccccgct ccgcgccgcc tcgcgccgcc cgccccggct
         2521 ctgactgacc gcgttactcc cacaggtgag cgggcgggac ggcccttctc ctccgggctg
         2581 taattagcgc ttggtttaat gacggctcgt ttcttttctg tggctgcgtg aaagccttaa
         2641 agggctccgg gagggccctt tgtgcggggg ggagcggctc ggggggtgcg tgcgtgtgtg
         2701 tgtgcgtggg gagcgccgcg tgcggcccgc gctgcccggc ggctgtgagc gctgcgggcg
         2761 cggcgcgggg ctttgtgcgc tccgcgtgtg cgcgagggga gcgcggccgg gggcggtgcc
         2821 ccgcggtgcg ggggggctgc gaggggaaca aaggctgcgt gcggggtgtg tgcgtggggg
         2881 ggtgagcagg gggtgtgggc gcggcggtcg ggctgtaacc cccccctgca cccccctccc
         2941 cgagttgctg agcacggccc ggcttcgggt gcggggctcc gtacggggcg tggcgcgggg
         3001 ctcgccgtgc cgggcggggg gtggcggcag gtgggggtgc cgggcggggc ggggccgcct
         3061 cgggccgggg agggctcggg ggaggggcgc ggcggccccc ggagcgccgg cggctgtcga
         3121 ggcgcggcga gccgcagcca ttgcctttta tggtaatcgt gcgagagggc gcagggactt
         3181 cctttgtccc aaatctgtgc ggagccgaaa tctgggaggc gccgccgcac cccctctagc
         3241 gggcgcgggg cgaagcggtg cggcgccggc aggaaggaaa tgggcgggga gggccttcgt
         3301 gcgtcgccgc gccgccgtcc ccttctccct ctccagcctc ggggctgtcc gcggggggac
         3361 ggctgccttc gggggggacg gggcagggcg gggttcggct tctggcgtgt gaccggcggc
         3421 tctagagcct ctgctaacca tgttcatgcc ttcttctttt tcctacagct cctgggcaac
         3481 gtgctggtta ttgtgctgtc tcatcatttt ggcaaagaat tgctcgagat gaaactatcc
         3541 atgaagaaca atattatcaa tacacagcag tcttttgtaa ccatgcccaa tgtgattgta
         3601 ccagatattg aaaaggaaat acgaaggatg gaaaatggag catgcagctc cttttctgag
         3661 gatgatgaca gtgcctctac atctgaagaa tcagagaatg aaaaccctca tgcaaggggt
         3721 tcctttagtt ataagtcact cagaaaggga ggaccatcac agagggagca gtacctgcct
         3781 ggtgccattg cactttttaa tgtgaacaac agcagcaata aggaccagga accagaagaa
         3841 aaaaagaaaa agaaaaaaga aaagaagagc aagtcagatg ataaaaacga aaataaaaac
         3901 gacccagaga agaaaaagaa gaaaaaggac aaagagaaga aaaagaaaga ggagaaaagc
         3961 aaagataaga aagaagagga gaagaaagaa gttgtggtta ttgatccctc gggaaacaca
         4021 tattacaact ggctgttttg catcacatta cctgttatgt acaactggac aatggttatt
         4081 gccagagcat gttttgatga acttcaatct gattacctag aatattggct cattttggat
         4141 tacgtatcag acatagtcta tttaatcgat atgtttgtac gaacaaggac aggttaccta
         4201 gaacaaggac tgctggtaaa ggaagaactt aaactcataa ataaatataa atccaacttg
         4261 caatttaaac ttgatgttct gtcactgata ccaactgatt tgctgtattt taagttaggg
         4321 tggaactatc cagaaattag attaaacagg ttgttacggt tctctcgtat gtttgagttc
         4381 ttccagagaa cagaaacaag gacaaactat ccaaacatct tcaggatttc caaccttgtt
         4441 atgtatatcg tcatcattat ccactggaat gcatgtgtgt tctactctat ttctaaagct
         4501 attggatttg gaaatgatac atgggtctac cctgatatta atgatcctga atttggccgt
         4561 ttggctagaa aatacgtata cagcctttac tggtctacac tgactttgac taccattggt
         4621 gaaacacccc ctcccgtgag ggattctgag tatgtctttg tggtggttga tttcctaatt
         4681 ggagtgttaa tttttgctac catcgttggt aacataggtt ctatgatttc caacatgaat
         4741 gcagccagag cagaatttca agcaagaatt gatgctatca agcaatatat gcattttcga
         4801 aatgtaagca aagatatgga aaagagggtt attaaatggt ttgactacct gtggaccaac
         4861 aaaaaaacag ttgatgagaa agaagtctta aagtatctac ctgataaact aagagcagaa
         4921 attgccatca acgttcactt agacacatta aaaaaggtac gcatttttgc tgattgtgaa
         4981 gctggtctgt tggtggagtt ggtcttgaaa ttgcaacccc aagtctacag tcctggagat
         5041 tatatttgca agaaagggga tatcggacga gagatgtaca ttatcaagga aggcaaactc
         5101 gctgtggtgg cagatgatgg agtcactcag tttgtggtat tgagcgatgg cagctacttc
         5161 ggtgagatca gcattcttaa cattaaaggg agcaaagctg gcaatcgaag aacggccaat
         5221 attaaaagta ttggctactc agacctgttc tgtctctcaa aagatgacct catggaagct
         5281 ctaactgagt acccagatgc caaaactatg ctggaagaga aagggaagca gattttaatg
         5341 aaagatggtc tactggatct aaacattgca aatgctggca gtgatcctaa agatcttgaa
         5401 gagaaggtta ctcgaatgga ggggtcagta gacctcctgc aaaccaggtt tgcccgaatc
         5461 ttggctgagt atgagtccat gcagcagaaa ctgaaacaaa gattaaccaa ggttgagaaa
         5521 tttctgaaac cgcttattga cacagaattt tcaagtattg agggacctgg agcggaaagt
         5581 gggcccatcg actctacaga ttacaaggat gacgacgata agtaggaatt cctgcagccc
         5641 ggccgctacg taaattccgc cccccccccc cctaacgtta ctggccgaag ccgcttggaa
         5701 taaggccggt gtgcgtttgt ctatatgtta ttttccacca tattgccgtc ttttggcaat
         5761 gtgagggccc ggaaacctgg ccctgtcttc ttgacgagca ttcctagggg tctttcccct
         5821 ctcgccaaag gaatgcaagg tctgttgaat gtcgtgaagg aagcagttcc tctggaagct
         5881 tcttgaagac aaacaacgtc tgtagcgacc ctttgcaggc agcggaaccc cccacctggc
         5941 gacaggtgcc tctgcggcca aaagccacgt gtataagata cacctgcaaa ggcggcacaa
         6001 ccccagtgcc acgttgtgag ttggatagtt gtggaaagag tcaaatggct ctcctcaagc
         6061 gtattcaaca aggggctgaa ggatgcccag aaggtacccc attgtatggg atctgatctg
         6121 gggcctcggt acacatgctt tacatgtgtt tagtcgaggt taaaaaaacg tctaggcccc
         6181 ccgaaccacg gggacgtggt tttcctttga aaaacacgat gataatatgg ccacaaccat
         6241 ggtgagcaag ggcgaggagc tgttcaccgg ggtggtgccc atcctggtcg agctggacgg
         6301 cgacgtaaac ggccacaagt tcagcgtgtc cggcgagggc gagggcgatg ccacctacgg
         6361 caagctgacc ctgaagttca tctgcaccac cggcaagctg cccgtgccct ggcccaccct
         6421 cgtgaccacc ctgacctacg gcgtgcagtg cttcagccgc taccccgacc acatgaagca
         6481 gcacgacttc ttcaagtccg ccatgcccga aggctacgtc caggagcgca ccatcttctt
         6541 caaggacgac ggcaactaca agacccgcgc cgaggtgaag ttcgagggcg acaccctggt
         6601 gaaccgcatc gagctgaagg gcatcgactt caaggaggac ggcaacatcc tggggcacaa
         6661 gctggagtac aactacaaca gccacaacgt ctatatcatg gccgacaagc agaagaacgg
         6721 catcaaggtg aacttcaaga tccgccacaa catcgaggac ggcagcgtgc agctcgccga
         6781 ccactaccag cagaacaccc ccatcggcga cggccccgtg ctgctgcccg acaaccacta
         6841 cctgagcacc cagtccgccc tgagcaaaga ccccaacgag aagcgcgatc acatggtcct
         6901 gctggagttc gtgaccgccg ccgggatcac tctcggcatg gacgagctgt acaagtaaag
         6961 cggccgcaat tcactcctca ggtgcaggct gcctatcaga aggtggtggc tggtgtggcc
         7021 aatgccctgg ctcacaaata ccactgagat ctttttccct ctgccaaaaa ttatggggac
         7081 atcatgaagc cccttgagca tctgacttct ggctaataaa ggaaatttat tttcattgca
         7141 atagtgtgtt ggaatttttt gtgtctatca ctcggaagga catatgggag ggcaaatcat
         7201 ttaaaacatc agaatgagta tttggtttag agtttggcaa catatgccca tatgctggct
         7261 gccatgaaca aaggttggct ataaagaggt catcagtata tgaaacagcc ccctgctgtc
         7321 cattccttat tccatagaaa agccttgact tgaggttaga ttttttttat attttgtttt
         7381 gtgttatttt tttctttaac atccctaaaa ttttccttac atgttttact agccagattt
         7441 ttcctcctct cctgactact cccagtcata gctgtccctc ttctcttatg gagatccctc
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    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片2
    产品细节图片3
    P3059/pEGFP-SOST人源基因质粒
    P0677/pCDNA3.0-TLR2-CFP人源基因质粒
    P0639/pCDNA3.1-VEGFA人源基因质粒
    P0629/CD8A-CD8B人源基因质粒
    P0539/Lenti-Puro-ARID1A人源基因质粒
    P0533/pEGFP-GRK2人源基因质粒
    P0534/pIRES2-ZsGreen1-P65人源基因质粒
    P0498/pcDNA3.1 SIRT6_H133Y人源基因质粒
    P0499/SIRT6 FLAG人源基因质粒
    P0500/pCXLE-hUL人源基因质粒
    P0501/pCXLE-hSK人源基因质粒
    P0502/pCXLE-hOCT3/4-shp53-F人源基因质粒
     

     

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