NF-κB (p50) Western Ready Cont

【求助】NF-kb

定量检测可以么？ 细胞因子 wrote: 可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里有很多这方面的帖子，你可以看看。 楼主的这种情况，只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测是不可以的，或者说是不严谨的。 首先，你要知道Nf-kb的激活通常与IkBs（IkBa、IkBβ、IkBε）的降解降解有关，但这并不绝对，也不是其唯一的途径，比如P50、p65的表达调节也可影响Nf-kb，况且IkBs还可细分为三种

Western blot实验步骤

excess secondary antibody from the blot with 3 rinses in 20-50 ml TTBS for 5 min. each. The blot is now ready for use with standard colorimetric or chemiluminescent detection reagents.Considerations:• Perhaps the most common problem in western blotting

【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗

1 为什么要用细胞总蛋白做p65,而不用胞核蛋白呢?这样胞浆的IKBα的水平和胞核NF-κB的水平是不是也可以的? 2 有些因子是通过促进P65核转位（自IkB解离，而IkB量并不变）,就是说IKB自解离,那实际上在NF-κB入核的过程中,胞浆的IKB用western做是不是也应该增加啊? 还是说在IKB没解离前,一抗就能和IKBα结合? 1 测NFkB活性变化，对于非磷酸化抗体，必须做核蛋白的western或EMSA，这是反映NFkB有无功能改变；如果核蛋白有变