- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P1140
- 2026年01月16日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
P600;IL-13
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pT7-His-IL13人源基因质粒
别称: P600;IL-13
复制子: pBR322
原核抗性: Kan
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Kan
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pT7-His-IL13是一个人源基因大肠表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6016 bp ds-DNA circular SYN 21-十二月-2016
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6016
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 141..159
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
protein_bind 160..184
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
RBS 199..221
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 240..257
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
misc_feature 276..1010
/note="IL13"
CDS 1017..1034
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
terminator 1101..1148
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
rep_origin 1185..1640
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
CDS complement(1733..2548)
/codon_start=1
/product="aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418
(Geneticin(R)) in eukaryotes"
/translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
rep_origin 2670..3258
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 3444..3586
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
CDS complement(3688..3879)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
CDS complement(4688..5770)
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
promoter complement(5771..5848)
/gene="lacI"
/note="lacI promoter"
ORIGIN
1 tcatgagccc gaagtggcga gcccgatctt ccccatcggt gatgtcggcg atataggcgc
61 cagcaaccgc acctgtggcg ccggtgatgc cggccacgat gcgtccggcg tagaggatcg
121 agatctcgat cccgcgaaat taatacgact cactataggg gaattgtgag cggataacaa
181 ttcccctcta gaaataattt tgtttaactt taagaaggag atataccatg ggcagcagcc
241 atcatcatca tcatcacagc agcggccgcg gatccatgct gttgctggga gctgttctac
301 tgctattagc tctgcccggt catgaccagg aaaccacgac tcaagggccc ggagtcctgc
361 ttcccctgcc caagggggcc tgcacaggtt ggatggcggg catcccaggg catccgggcc
421 ataatggggc cccaggccgt gatggcagag atggcacccc tggtgagaag ggtgagaaag
481 gagatccagg tcttattggt cctaagggag acatcggtga aaccggagta cccggggctg
541 aaggtccccg aggctttccg ggaatccaag gcaggaaagg agaacctgga gaaggtgcct
601 atgtataccg ctcagcattc agtgtgggat tggagactta cgttactatc cccaacatgc
661 ccattcgctt taccaagatc ttctacaatc agcaaaacca ctatgatggc tccactggta
721 aattccactg caacattcct gggctgtact actttgccta ccacatcaca gtctatatga
781 aggatgtgaa ggtcagcctc ttcaagaagg acaaggctat gctcttcacc tatgatcagt
841 accaggaaaa taatgtggac caggcctccg gctctgtgct cctgcatctg gaggtgggcg
901 accaagtctg gctccaggtg tatggggaag gagagcgtaa tggactctat gctgataatg
961 acaatgactc caccttcaca ggctttcttc tctaccatga caccaactga ctcgagcacc
1021 accaccacca ccactgagat ccggctgcta acaaagcccg aaaggaagct gagttggctg
1081 ctgccaccgc tgagcaataa ctagcataac cccttggggc ctctaaacgg gtcttgaggg
1141 gttttttgct gaaaggagga actatatccg gattggcgaa tgggacgcgc cctgtagcgg
1201 cgcattaagc gcggcgggtg tggtggttac gcgcagcgtg accgctacac ttgccagcgc
1261 cctagcgccc gctcctttcg ctttcttccc ttcctttctc gccacgttcg ccggctttcc
1321 ccgtcaagct ctaaatcggg ggctcccttt agggttccga tttagtgctt tacggcacct
1381 cgaccccaaa aaacttgatt agggtgatgg ttcacgtagt gggccatcgc cctgatagac
1441 ggtttttcgc cctttgacgt tggagtccac gttctttaat agtggactct tgttccaaac
1501 tggaacaaca ctcaacccta tctcggtcta ttcttttgat ttataaggga ttttgccgat
1561 ttcggcctat tggttaaaaa atgagctgat ttaacaaaaa tttaacgcga attttaacaa
1621 aatattaacg tttacaattt caggtggcac ttttcgggga aatgtgcgcg gaacccctat
1681 ttgtttattt ttctaaatac attcaaatat gtatccgctc atgaattaat tcttagaaaa
1741 actcatcgag catcaaatga aactgcaatt tattcatatc aggattatca ataccatatt
1801 tttgaaaaag ccgtttctgt aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc cataggatgg
1861 caagatcctg gtatcggtct gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa cctattaatt
1921 tcccctcgtc aaaaataagg ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg actgaatccg
1981 gtgagaatgg caaaagttta tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc cagccattac
2041 gctcgtcatc aaaatcactc gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat tgcgcctgag
2101 cgagacgaaa tacgcgatcg ctgttaaaag gacaattaca aacaggaatc gaatgcaacc
2161 ggcgcaggaa cactgccagc gcatcaacaa tattttcacc tgaatcagga tattcttcta
2221 atacctggaa tgctgttttc ccggggatcg cagtggtgag taaccatgca tcatcaggag
2281 tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag tttagtctga
2341 ccatctcatc tgtaacatca ttggcaacgc tacctttgcc atgtttcaga aacaactctg
2401 gcgcatcggg cttcccatac aatcgataga ttgtcgcacc tgattgcccg acattatcgc
2461 gagcccattt atacccatat aaatcagcat ccatgttgga atttaatcgc ggcctagagc
2521 aagacgtttc ccgttgaata tggctcataa caccccttgt attactgttt atgtaagcag
2581 acagttttat tgttcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca
2641 gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc
2701 tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta
2761 ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt
2821 ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc
2881 gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg
2941 ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg
3001 tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag
3061 ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc
3121 agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat
3181 agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg
3241 gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc
3301 tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt
3361 accgcctttg agtgagctga taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca
3421 gtgagcgagg aagcggaaga gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt
3481 atttcacacc gcatatatgg tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc gcatagttaa
3541 gccagtatac actccgctat cgctacgtga ctgggtcatg gctgcgcccc gacacccgcc
3601 aacacccgct gacgcgccct gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt acagacaagc
3661 tgtgaccgtc tccgggagct gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac cgaaacgcgc
3721 gaggcagctg cggtaaagct catcagcgtg gtcgtgaagc gattcacaga tgtctgcctg
3781 ttcatccgcg tccagctcgt tgagtttctc cagaagcgtt aatgtctggc ttctgataaa
3841 gcgggccatg ttaagggcgg ttttttcctg tttggtcact gatgcctccg tgtaaggggg
3901 atttctgttc atgggggtaa tgataccgat gaaacgagag aggatgctca cgatacgggt
3961 tactgatgat gaacatgccc ggttactgga acgttgtgag ggtaaacaac tggcggtatg
4021 gatgcggcgg gaccagagaa aaatcactca gggtcaatgc cagcgcttcg ttaatacaga
4081 tgtaggtgtt ccacagggta gccagcagca tcctgcgatg cagatccgga acataatggt
4141 gcagggcgct gacttccgcg tttccagact ttacgaaaca cggaaaccga agaccattca
4201 tgttgttgct caggtcgcag acgttttgca gcagcagtcg cttcacgttc gctcgcgtat
4261 cggtgattca ttctgctaac cagtaaggca accccgccag cctagccggg tcctcaacga
4321 caggagcacg atcatgcgca cccgtggggc cgccatgccg gcgataatgg cctgcttctc
4381 gccgaaacgt ttggtggcgg gaccagtgac gaaggcttga gcgagggcgt gcaagattcc
4441 gaataccgca agcgacaggc cgatcatcgt cgcgctccag cgaaagcggt cctcgccgaa
4501 aatgacccag agcgctgccg gcacctgtcc tacgagttgc atgataaaga agacagtcat
4561 aagtgcggcg acgatagtca tgccccgcgc ccaccggaag gagctgactg ggttgaaggc
4621 tctcaagggc atcggtcgag atcccggtgc ctaatgagtg agctaactta cattaattgc
4681 gttgcgctca ctgcccgctt tccagtcggg aaacctgtcg tgccagctgc attaatgaat
4741 cggccaacgc gcggggagag gcggtttgcg tattgggcgc cagggtggtt tttcttttca
4801 ccagtgagac gggcaacagc tgattgccct tcaccgcctg gccctgagag agttgcagca
4861 agcggtccac gctggtttgc cccagcaggc gaaaatcctg tttgatggtg gttaacggcg
4921 ggatataaca tgagctgtct tcggtatcgt cgtatcccac taccgagata tccgcaccaa
4981 cgcgcagccc ggactcggta atggcgcgca ttgcgcccag cgccatctga tcgttggcaa
5041 ccagcatcgc agtgggaacg atgccctcat tcagcatttg catggtttgt tgaaaaccgg
5101 acatggcact ccagtcgcct tcccgttccg ctatcggctg aatttgattg cgagtgagat
5161 atttatgcca gccagccaga cgcagacgcg ccgagacaga acttaatggg cccgctaaca
5221 gcgcgatttg ctggtgaccc aatgcgacca gatgctccac gcccagtcgc gtaccgtctt
5281 catgggagaa aataatactg ttgatgggtg tctggtcaga gacatcaaga aataacgccg
5341 gaacattagt gcaggcagct tccacagcaa tggcatcctg gtcatccagc ggatagttaa
5401 tgatcagccc actgacgcgt tgcgcgagaa gattgtgcac cgccgcttta caggcttcga
5461 cgccgcttcg ttctaccatc gacaccacca cgctggcacc cagttgatcg gcgcgagatt
5521 taatcgccgc gacaatttgc gacggcgcgt gcagggccag actggaggtg gcaacgccaa
5581 tcagcaacga ctgtttgccc gccagttgtt gtgccacgcg gttgggaatg taattcagct
5641 ccgccatcgc cgcttccact ttttcccgcg ttttcgcaga aacgtggctg gcctggttca
5701 ccacgcggga aacggtctga taagagacac cggcatactc tgcgacatcg tataacgtta
5761 ctggtttcac attcaccacc ctgaattgac tctcttccgg gcgctatcat gccataccgc
5821 gaaaggtttt gcgccattcg atggtgtccg ggatctcgac gctctccctt atgcgactcc
5881 tgcattagga agcagcccag tagtaggttg aggccgttga gcaccgccgc cgcaaggaat
5941 ggtgcatgca aggagatggc gcccaacagt cccccggcca cggggcctgc caccataccc
6001 acgccgaaac aagcgc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pT7-His-IL13人源基因质粒
别称: P600;IL-13
| 启动子: | T7 |
|---|
原核抗性: Kan
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Kan
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pT7-His-IL13是一个人源基因大肠表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6016 bp ds-DNA circular SYN 21-十二月-2016
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6016
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 141..159
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
protein_bind 160..184
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
RBS 199..221
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 240..257
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
misc_feature 276..1010
/note="IL13"
CDS 1017..1034
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
terminator 1101..1148
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
rep_origin 1185..1640
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
CDS complement(1733..2548)
/codon_start=1
/product="aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418
(Geneticin(R)) in eukaryotes"
/translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
rep_origin 2670..3258
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 3444..3586
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
CDS complement(3688..3879)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
CDS complement(4688..5770)
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
promoter complement(5771..5848)
/gene="lacI"
/note="lacI promoter"
ORIGIN
1 tcatgagccc gaagtggcga gcccgatctt ccccatcggt gatgtcggcg atataggcgc
61 cagcaaccgc acctgtggcg ccggtgatgc cggccacgat gcgtccggcg tagaggatcg
121 agatctcgat cccgcgaaat taatacgact cactataggg gaattgtgag cggataacaa
181 ttcccctcta gaaataattt tgtttaactt taagaaggag atataccatg ggcagcagcc
241 atcatcatca tcatcacagc agcggccgcg gatccatgct gttgctggga gctgttctac
301 tgctattagc tctgcccggt catgaccagg aaaccacgac tcaagggccc ggagtcctgc
361 ttcccctgcc caagggggcc tgcacaggtt ggatggcggg catcccaggg catccgggcc
421 ataatggggc cccaggccgt gatggcagag atggcacccc tggtgagaag ggtgagaaag
481 gagatccagg tcttattggt cctaagggag acatcggtga aaccggagta cccggggctg
541 aaggtccccg aggctttccg ggaatccaag gcaggaaagg agaacctgga gaaggtgcct
601 atgtataccg ctcagcattc agtgtgggat tggagactta cgttactatc cccaacatgc
661 ccattcgctt taccaagatc ttctacaatc agcaaaacca ctatgatggc tccactggta
721 aattccactg caacattcct gggctgtact actttgccta ccacatcaca gtctatatga
781 aggatgtgaa ggtcagcctc ttcaagaagg acaaggctat gctcttcacc tatgatcagt
841 accaggaaaa taatgtggac caggcctccg gctctgtgct cctgcatctg gaggtgggcg
901 accaagtctg gctccaggtg tatggggaag gagagcgtaa tggactctat gctgataatg
961 acaatgactc caccttcaca ggctttcttc tctaccatga caccaactga ctcgagcacc
1021 accaccacca ccactgagat ccggctgcta acaaagcccg aaaggaagct gagttggctg
1081 ctgccaccgc tgagcaataa ctagcataac cccttggggc ctctaaacgg gtcttgaggg
1141 gttttttgct gaaaggagga actatatccg gattggcgaa tgggacgcgc cctgtagcgg
1201 cgcattaagc gcggcgggtg tggtggttac gcgcagcgtg accgctacac ttgccagcgc
1261 cctagcgccc gctcctttcg ctttcttccc ttcctttctc gccacgttcg ccggctttcc
1321 ccgtcaagct ctaaatcggg ggctcccttt agggttccga tttagtgctt tacggcacct
1381 cgaccccaaa aaacttgatt agggtgatgg ttcacgtagt gggccatcgc cctgatagac
1441 ggtttttcgc cctttgacgt tggagtccac gttctttaat agtggactct tgttccaaac
1501 tggaacaaca ctcaacccta tctcggtcta ttcttttgat ttataaggga ttttgccgat
1561 ttcggcctat tggttaaaaa atgagctgat ttaacaaaaa tttaacgcga attttaacaa
1621 aatattaacg tttacaattt caggtggcac ttttcgggga aatgtgcgcg gaacccctat
1681 ttgtttattt ttctaaatac attcaaatat gtatccgctc atgaattaat tcttagaaaa
1741 actcatcgag catcaaatga aactgcaatt tattcatatc aggattatca ataccatatt
1801 tttgaaaaag ccgtttctgt aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc cataggatgg
1861 caagatcctg gtatcggtct gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa cctattaatt
1921 tcccctcgtc aaaaataagg ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg actgaatccg
1981 gtgagaatgg caaaagttta tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc cagccattac
2041 gctcgtcatc aaaatcactc gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat tgcgcctgag
2101 cgagacgaaa tacgcgatcg ctgttaaaag gacaattaca aacaggaatc gaatgcaacc
2161 ggcgcaggaa cactgccagc gcatcaacaa tattttcacc tgaatcagga tattcttcta
2221 atacctggaa tgctgttttc ccggggatcg cagtggtgag taaccatgca tcatcaggag
2281 tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag tttagtctga
2341 ccatctcatc tgtaacatca ttggcaacgc tacctttgcc atgtttcaga aacaactctg
2401 gcgcatcggg cttcccatac aatcgataga ttgtcgcacc tgattgcccg acattatcgc
2461 gagcccattt atacccatat aaatcagcat ccatgttgga atttaatcgc ggcctagagc
2521 aagacgtttc ccgttgaata tggctcataa caccccttgt attactgttt atgtaagcag
2581 acagttttat tgttcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca
2641 gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc
2701 tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta
2761 ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt
2821 ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc
2881 gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg
2941 ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg
3001 tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag
3061 ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc
3121 agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat
3181 agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg
3241 gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc
3301 tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt
3361 accgcctttg agtgagctga taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca
3421 gtgagcgagg aagcggaaga gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt
3481 atttcacacc gcatatatgg tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc gcatagttaa
3541 gccagtatac actccgctat cgctacgtga ctgggtcatg gctgcgcccc gacacccgcc
3601 aacacccgct gacgcgccct gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt acagacaagc
3661 tgtgaccgtc tccgggagct gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac cgaaacgcgc
3721 gaggcagctg cggtaaagct catcagcgtg gtcgtgaagc gattcacaga tgtctgcctg
3781 ttcatccgcg tccagctcgt tgagtttctc cagaagcgtt aatgtctggc ttctgataaa
3841 gcgggccatg ttaagggcgg ttttttcctg tttggtcact gatgcctccg tgtaaggggg
3901 atttctgttc atgggggtaa tgataccgat gaaacgagag aggatgctca cgatacgggt
3961 tactgatgat gaacatgccc ggttactgga acgttgtgag ggtaaacaac tggcggtatg
4021 gatgcggcgg gaccagagaa aaatcactca gggtcaatgc cagcgcttcg ttaatacaga
4081 tgtaggtgtt ccacagggta gccagcagca tcctgcgatg cagatccgga acataatggt
4141 gcagggcgct gacttccgcg tttccagact ttacgaaaca cggaaaccga agaccattca
4201 tgttgttgct caggtcgcag acgttttgca gcagcagtcg cttcacgttc gctcgcgtat
4261 cggtgattca ttctgctaac cagtaaggca accccgccag cctagccggg tcctcaacga
4321 caggagcacg atcatgcgca cccgtggggc cgccatgccg gcgataatgg cctgcttctc
4381 gccgaaacgt ttggtggcgg gaccagtgac gaaggcttga gcgagggcgt gcaagattcc
4441 gaataccgca agcgacaggc cgatcatcgt cgcgctccag cgaaagcggt cctcgccgaa
4501 aatgacccag agcgctgccg gcacctgtcc tacgagttgc atgataaaga agacagtcat
4561 aagtgcggcg acgatagtca tgccccgcgc ccaccggaag gagctgactg ggttgaaggc
4621 tctcaagggc atcggtcgag atcccggtgc ctaatgagtg agctaactta cattaattgc
4681 gttgcgctca ctgcccgctt tccagtcggg aaacctgtcg tgccagctgc attaatgaat
4741 cggccaacgc gcggggagag gcggtttgcg tattgggcgc cagggtggtt tttcttttca
4801 ccagtgagac gggcaacagc tgattgccct tcaccgcctg gccctgagag agttgcagca
4861 agcggtccac gctggtttgc cccagcaggc gaaaatcctg tttgatggtg gttaacggcg
4921 ggatataaca tgagctgtct tcggtatcgt cgtatcccac taccgagata tccgcaccaa
4981 cgcgcagccc ggactcggta atggcgcgca ttgcgcccag cgccatctga tcgttggcaa
5041 ccagcatcgc agtgggaacg atgccctcat tcagcatttg catggtttgt tgaaaaccgg
5101 acatggcact ccagtcgcct tcccgttccg ctatcggctg aatttgattg cgagtgagat
5161 atttatgcca gccagccaga cgcagacgcg ccgagacaga acttaatggg cccgctaaca
5221 gcgcgatttg ctggtgaccc aatgcgacca gatgctccac gcccagtcgc gtaccgtctt
5281 catgggagaa aataatactg ttgatgggtg tctggtcaga gacatcaaga aataacgccg
5341 gaacattagt gcaggcagct tccacagcaa tggcatcctg gtcatccagc ggatagttaa
5401 tgatcagccc actgacgcgt tgcgcgagaa gattgtgcac cgccgcttta caggcttcga
5461 cgccgcttcg ttctaccatc gacaccacca cgctggcacc cagttgatcg gcgcgagatt
5521 taatcgccgc gacaatttgc gacggcgcgt gcagggccag actggaggtg gcaacgccaa
5581 tcagcaacga ctgtttgccc gccagttgtt gtgccacgcg gttgggaatg taattcagct
5641 ccgccatcgc cgcttccact ttttcccgcg ttttcgcaga aacgtggctg gcctggttca
5701 ccacgcggga aacggtctga taagagacac cggcatactc tgcgacatcg tataacgtta
5761 ctggtttcac attcaccacc ctgaattgac tctcttccgg gcgctatcat gccataccgc
5821 gaaaggtttt gcgccattcg atggtgtccg ggatctcgac gctctccctt atgcgactcc
5881 tgcattagga agcagcccag tagtaggttg aggccgttga gcaccgccgc cgcaaggaat
5941 ggtgcatgca aggagatggc gcccaacagt cccccggcca cggggcctgc caccataccc
6001 acgccgaaac aagcgc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1310/pCDNA3.1-LPAR2人源基因质粒 |
| P1224/pCDNA3.1-FLAG-LPAR2人源基因质粒 |
| P4101/pCDNA3.1-3×HA-TBK1人源基因质粒 |
| P4102/pCDNA3.1-3×HA-TRAF3人源基因质粒 |
| P4103/pCDNA3.1-3×HA-MAVS人源基因质粒 |
| P4104/pCDNA3.1-3×HA-MDA5人源基因质粒 |
| P4263/pCDNA3.1-HA-STAT1-Myc人源基因质粒 |
| P4105/pCDNA3.1-HA-STAT2-Myc人源基因质粒 |
| P4106/pLVX-IRES-Puro-MEN1人源基因质粒 |
| P1235/pCDH-puro-Bcl-XL人源基因质粒 |
| P1745/pActin-EGFP-beta-Actin (Homo)人源基因质粒 |
| P1246/pECMV-3×FLAG-DRD2人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
shinesnowing 想构建一个能通过接合作用进入野生型弧菌并在其中表达外源基因的质粒，现在找到一个名为pBOR8的质粒，只有质粒简图，没找到全序列，质粒上的元件为ori R6K、mob RP4、Ap、lacIq，如下图: 现有两个问题想请教各位高人 （1）该质粒能否直接作为表达载体，将外源基因克隆到该质粒上，如果可以通常外源基因应该克隆到哪个位点？ （2）如果不能直接进行外源基因克隆和表达，那么应该
分，一是未稳定整合的，一是稳定整合的，所以开始时亮度要高。 2.为什么筛选后单克隆无荧光：首先，经过G418筛选，外源质粒不能整合入染色体的细胞死亡；其次，稳定整合的细胞外源质粒整合的位置存在位置效应，即整合于不利于外源基因表达的位置，从而使外源基因沉默；第三，我不知道你的质粒中是否加入了核糖体进入位点序列，如果有的话，研究显示该位点前后的基因表达水平存在不同，可以查查相关文献 3.有无好的办法：我认为没有，稳定转染筛选时有运气的成分，假如外源质粒恰好整合到了利于表达的染色体部位，这时筛
一、实验目的 学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。 二、实验原理 上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。 外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入
pT7-His-IL13人源基因质粒
￥100 - 1000
