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- Xybio
- 上海
- P0636
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_199115.2
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：Angptl4-r大鼠基因质粒
别称: NM_199115.2
质粒分类: 基因文库质粒；大鼠基因质粒；大鼠克隆质粒
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：大鼠
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
Angptl4-r质粒可以提供Angptl4大鼠源基因模板。Rattus norvegicus angiopoietin-like 4 (Angptl4), mRNA.Angptl4 在NCBI中基因编号：NM_199115.2
质粒图谱
质粒序列
ORIGIN
1 atgcgctgcg ctccgaccgc aggcgctgct ctagtgctat gcgcagctac tgcggggctg
61 ctgagcgcgc aagggcgccc tgcacagccg gagccgccgc gcttcgcatc ctgggatgaa
121 atgaacttgc tggctcacgg gctgctgcag ctcggtcacg ggctgcggga acacgtggag
181 cgcacccgtg gacagctggg cgcgctggaa cgccgcatgg ctgcctgcgg taacgcttgc
241 caggggccca aggggacaga cccgaaggat agagtccccg aaggccaggc tcctgagact
301 ctgcagagtt tacagactca actcaaggct cagaacagca agatccagca actgttccag
361 aaggtagccc agcagcagag atacctatca aagcagaatc tgagaataca gaatcttcag
421 agccagattg acctcttgac ccccacacac ctagacaatg gggtagacaa gacttcgagg
481 ggaaagaggc ttcccaagat ggcccagctc attggcttga ctcccaacgc cacccgctta
541 cacaggcctc cccgggactg ccaggaactc tttcaagaag gggagcggca cagtggactt
601 ttccagatcc agcctctggg atctccacca tttttggtca actgtgagat gacttcagat
661 ggaggctgga cggtgattca gagacgcctg aacggctctg tggacttcaa tcagtcttgg
721 gaagcctaca aagatggctt cggagatccc caaggcgagt tctggctggg cctagagaag
781 atgcacagca tcacagggga ccgaggaagc cagttggctg tgcagctcca ggactgggat
841 ggcaatgcca aattgctcca atttcctatc catttggggg gtgaggacac agcctacagc
901 ctgcagctca ccgagcccac ggccaatgag ctgggtgcca ccaatgtttc ccccaatggc
961 ctttccctgc ccttctctac ctgggaccaa gaccacgacc tccgagggga ccttaactgt
1021 gccaagagcc tctctggtgg ctggtggttt ggcacctgca gccattccaa tctaaatgga
1081 caatacttcc actctattcc acggcaacgg cagcagcgta aaaaggggat cttctggaaa
1141 acatggaagg gccgctacta tccactacag gctaccaccc tgttgatcca gcccatggag
1201 gctacagcag cctcctag
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
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文献和实验相对应的大鼠基因 . 1. 进入 entrez gene . 2.search gene for p21 To limit your search to a specific field, select:gene name Limit by Taxonomy: Mammalia: Homo sapiens 3. 选择第一个 CDKN1A, 在 link 中新窗口打开 homologene得到： R.norvegicus--- Cdkn1a--- cyclin
（三）分类 1.根据通过细菌的接合作用进行传递与否：分为一般分子量较大如F质粒、R质粒的接合性质粒和分子量较小如志贺菌毒力质粒的非接合性质粒两类。 2.根据质粒的相容性与否：分为不相容性及相容性两类。前者指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一个宿主菌内的现象，反之为相容性。 3.根据质粒基因编码的生物学性状分类：如编码细菌性菌毛的F质粒；携带耐药性基因，使细菌产生抗菌药物耐药性的R质粒；编码大肠埃希菌细菌素的Col质粒
shinesnowing 想构建一个能通过接合作用进入野生型弧菌并在其中表达外源基因的质粒，现在找到一个名为pBOR8的质粒，只有质粒简图，没找到全序列，质粒上的元件为ori R6K、mob RP4、Ap、lacIq，如下图: 现有两个问题想请教各位高人 （1）该质粒能否直接作为表达载体，将外源基因克隆到该质粒上，如果可以通常外源基因应该克隆到哪个位点？ （2）如果不能直接进行外源基因克隆和表达，那么应该
