这是近期做的β-actin的分析,除了在43k出现条带外,在30k附近出现了一条带,请高手给指点一下,下面的带是怎么回事,这个上样量可能有点大,具体多少未做定蛋白,不知道大家出现过这个情况吗?
背景很高,可能封闭的不好;4度过夜杂一抗试试。
首先,抗体是否为单抗,如果是多抗就很可能伴随有杂带;其次,你的蛋白放了多长时间,存储方法是否得当,可以考虑下是否是因为蛋白已经出现降解的原因。
我也感觉是你抗体的特异性问题,换一个其他品牌的该抗体试试。
可能是你的抗体的特异性不好,可以尝试封闭久一点看一下,一抗敷好之后洗膜时间延长也会有效果的,或者采用不同的转染方法,湿转或半干转
可能是你的抗体的特异性不好,可以尝试封闭久一点看一下,一抗敷好之后洗膜时间延长也会有效果的。
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