Western Blot的疑问

Western Blot的疑问

wjx98801 16 评论 537 阅读

实验室其他人很少出现的情况发生在我身上,试剂和膜等都是公用,上样量什么的都很仔细,beta-actin每次显色灰度都不一样,而且同一批样本加样两次显色也不一样,为啥????

超方便的实验干货查询工具

微信扫码进入「丁香实验」小程序

16 条评论
  1/4  

  • lott2008 2013-03-30  4

    我觉得是显色液没有加均匀,加了显色液以后的曝光时间也不同,所以出现这种情况

  • shefoundme 2017-10-15  2

    其实问题出在方法学上,ap显色和ECL成像,都属于酶促进动力学反应,采用终点法检测动力学反应,一定是得不到准确的结果!请联系您身边的基因公司人员,借用近红外荧光二抗,解决WB重复性问题!

  •   转膜时,膜与凝胶未能紧紧贴在一起(比如有很小的气泡未赶出来),贴的好的地方,转上的蛋白就多,显色时颜色自然就深,反之则浅。

  • wb的可能性太多了1.胶浓度是否一致,浓缩胶位置是否一致,30%AB用前有没有混匀;2.run胶时间长短是否一致;3.转膜时间条件,滤纸铺的有无气泡,是否造成转膜不均匀;4.孵抗体是否均匀,稀释抗体时由于 比例问题原液取得准确与否;5.发光液是否吹的均匀;最简单的办法就是再重复一次

  • 应该是曝光时间的问题哈,还有一个在进行显色的时候膜没有铺平,导致显色液不能够均匀接触膜

  • 请登录后参与评论,

    我的询价

    询价列表

    暂时没有已询价产品

    inquiry icon 快捷询价
      当你希望让更多商家联系你时,可以勾选后发送询价,平台会将你的询价消息推荐给更多商家。
      个人收货地址

      编辑个人收货信息

      yanxuan

      关注「丁香通研选」

      微信及时获得商家回复,

      获得更多交易信息和保障。

      丁香实验小程序

      微信关注
      丁香实验

      意见反馈