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成年小鼠的灌流实验

标签: 成年 小鼠 灌流

成年小鼠的灌流实验主要用于:(1)获得良好的形态学观察结果;(2)保存脑、肾、心脏和其他器官。

实验方法
  • 成年小鼠的灌流实验
实验方法原理

进行实验动物灌流是获得良好的形态学观察结果以及保存脑、肾、心脏和其他许多器官所必需的。

实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤

1.  一支针管吸满1×PBS,另一支吸4%PFA固定液(4℃),搁置待用。

 

2.  在袋中用CO2气体处死小鼠。停止吸呼后,立刻背朝下放平小鼠,小心剖开胸腔防止过多出血,小心并迅速切开肋骨,剪去横隔膜,暴露心脏。

 

3.  小心将吸有1×PBS的针管刺入左心室,剖开右心室排液。缓慢但持续将1×PBS灌入心脏(如灌流正常,血液丰富器官,如肝脏,脾脏和肾脏将转呈灰白色)。


4.  当多数血液已流出后,拨去1×PBS的针管将吸有4%PFA固定液的针管插入左心室同一进针处,以20 ml 固定液缓慢灌流小鼠。

 

5.  灌流后,剖下器官或组织,放入盛有4%PFA固定液的做好标记玻璃瓶中,于冰上保存。

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注意事项
对于未经训练的实验人员,初次进行灌流可能会失败,故建议首先用一些对照实验动物练习,以熟悉此过程。 
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