如何收集细胞(用于western blot等)
问:我现在在养细胞,然后收细胞抽蛋白以及提RNA用,我想先多收点细胞冻着。想问一下怎样收集细胞,有具体的流程吗?我是这样做的:1、将细胞消化吹打后转移至离心管离心2、倒去上清,加1 mlPBS打匀后转移至1.5 ml EP管3、离心12000 rpm 2 min (不知道大家这里用多少转速,有讲究吗?)4、倒去上清,我是将EP管倒置一会,但是EP管里面还是有一些上清,我没有倒干净,请问是 ...
来源:互联网 36480 阅读
正常人外周血白细胞的分离
正常人外周血白细胞的分离
来源:互联网 32826 阅读
细胞/组织裂解液
细胞/组织裂解液:1. 溶液准备:2×样品缓冲液:130mM Tris-HCl ( pH8.0 ) 20% ( v/v ) 甘油 4.6% ( w/v ) SDS 0.02% 溴酚蓝;2%DTT;PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4 ,50mM NaCl,2.7mM KCl;RIPA缓冲液:50mM Tris-HCl ...
来源:互联网 26528 阅读
细胞裂解和提取蛋白等相关问题
DXY网友mao_xianwang提问:最近测酶活性,但觉问题一大堆!1、接种六孔板时如何尽量让细胞接种均匀?2、给细胞染毒时我听说有两种方案,比如说染三天毒(1)先接种20%-30%,三天之后收获时刚好长满(2)一开始就接种70%-80%,然后以3%或者5%血清,这样尽量不让细胞分裂增值,三天之后收获试问,哪个更可行呢?3、提总蛋白时有人先把细胞吹下来然后裂解,有人直接把裂解液加进板子 ...
来源:互联网 25012 阅读