关键词: 多聚赖氨酸 配制 保存 使用
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二十二、制备多聚赖氨酸盖玻片方法一
用超纯水配成母液浓度为1mg/ml的多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine),分装好以后-20度保存,用的时后再冻融。
方法:
1.吸取约0.25ml滴在无菌的盖玻片上过夜,使多聚赖氨酸粘附在盖玻片上。
2.第二天吸去多余的多聚赖氨酸溶液,把盖玻片依次经去离子水、Tyrode溶液和去离子水浸洗两次。
3.空气干噪并用紫外灯照射15分钟后即可使用(不要求无菌的话操作可简单一些)。
二十三、制备多聚赖氨酸盖玻片方法二
自来水浸2h,浸酸过夜,自来水冲洗干净,95%乙醇浸12h,70度烤干,高压处理,涂一层多聚赖氨酸(0.025mg/ml),室温包被4h,DD水冲洗10遍,无水乙醇冲洗,超净台风干。盖玻片易碎,处理时动作要轻,还有一次多处理一点,备用。
1.多聚赖氨酸不能高压灭菌,本身就是氨基酸,高压会破坏它的成分。
2.多聚赖氨酸可以紫外照射,包括国外的文献,都说过用之前用紫外照射。
3.做之前要先把游离的多聚赖氨酸洗去。
综观上述,有个别细节问题大家的建议好像不太统一或者我没有找到答案:
1.能否紫外照射铺好多聚赖氨酸的板子?
有战友提到:不能。
其他很多战友提到除过滤外使用紫外灭菌。
2.配好的存储液能否反复冻融?
有战友提到:“多聚赖氨酸在水溶液中易分解,所以一次不要配太多工作液。”
战友提到:不能反复冻融。
没有看到明确说反复冻融无影响的。
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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