七、资料:多聚赖氨酸溶液(Poly-L-Lysine Solution)Conc.: 0.1% w/v, in water Storage: 18-26℃Thimerosal, 0.01%, added as preservative 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。
适用组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等使用的玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养,增加细胞贴壁能力。
八、使用说明
操作步骤(可直接在玻片上涂布)
1.灭菌的ddH2O 1:10稀释该多聚赖氨酸溶液。
2.用之前将稀释的多聚赖氨酸溶液放在室内,使其温度到室温18-26℃
3.将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。
4.在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
九、注意事项
1.每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片40-90张, 超过90张片子将影响其黏合力。
2.用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3.不要在用过的稀释液中加新的溶液。
4.释过的多聚赖氨酸溶液要放在2-8℃,至少在3个月内是稳定的。
5.用过的稀释液要过滤,若出现浑浊或长菌要丢弃。
十、将0.5%多聚赖氨酸溶液加入细胞培养皿中,浸泡5-10分钟并自然晾干待用即可。
十一、多聚赖氨酸(poly-l-lysine):常用包被培养皿的基质之一.。
1.配制硼酸缓冲液(PH8.4)
A液:硼砂溶液--1.907g溶于100ml三蒸水(0.05M)
B液:硼酸溶液--1.237g溶于100ml三蒸水(0.2M)
4.5mlA液+5.5mlB液=硼酸缓冲液(PH8.4)
2.多聚赖氨酸5mg溶于50ml硼酸缓冲液中,配成100μg/ml的多聚赖氨酸溶液。过滤除菌,-20度保存。
3.使用时4倍稀释,可以重复使用3次!