总RNA 的非变性电泳检测
总 RNA 的电泳检测,原来我使用 Lambda DNA/EcoR I (或者 Hind III)酶切 Marker,现在基本上不再用 Marker 了。指示剂一定是溴酚蓝加二甲苯氰,胶浓度 1-1.2%。加样后,开始电泳 (电压的选择的唯一依据是,我后面的时间安排。)。 溴酚蓝出孔 2-3cm 后终止电泳,紫外观察。首先能吸引我的一定是非常亮的位置(是否上样过量),然后观察溴酚蓝到二甲苯氰之间的 ...
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RNA Markers的使用方法(适用于RNA Marker RL1,000、RL6,000、RL10,000)
RNA Marker ( RL1000; RL6000; RL10000) 可以进行一般琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。以RL10000为例,具体使用方法如下:普通琼脂糖凝胶电泳时1.按下列组份配置RNA Marker样品。2.均匀混合后65℃加热10分钟,迅速冷却至室温(最好用PCR仪)。3.使用高质量的琼脂糖,用1×TAE Buffer制备3%凝胶*,制胶时凝胶中请 ...
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RNA凝胶电泳试验
实验基本原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三条带,且28s rRNA的亮度应为18s rRNA ...
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甲醛变性电泳检测RNA完整性
甲醛变性电泳检测RNA完整性:在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose (Sigama),再加20mL 10×TAE Buffer,144mLDEPC处理过的双蒸水,微波炉中化胶,待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛,放置一段时间以减少甲醛蒸汽。
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