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【视频】配合 TRIZOL 试剂的 RNA 提取(含 microRNA)

关键词: RNA 提取 2018-04-09 10:56 来源:天漠 点击次数:5666

本方法无需传统 TRIZOL 提取方法的相分离,而且不需要使用任何有毒有害的试剂(例如氯仿),7 分钟就可完成整个操作步骤并且可以提取到含 microRNA 的总 RNA。

1.先用 TRIZOL 或类似的试剂裂解样品
本表格针对各种样品列出了参考用量,详细用量请参见说明书

a)细胞样品


针对细胞重悬液,添加 3 倍体积的 TRIZOL 到 1 体积的细胞悬液中。

b)组织样品

C)液体样品

2.纯化过程
a) 添加等体积的 100% 无水乙醇到TRIZOL的裂解物中混合。
b) 把混合物加到 ZYMO-SPIN IIC 柱上并且套在收集管里,离心,去除滤出液。
c) 可以采用柱上消化的 DNA 的步骤去除 DNA.(可选)
d) 添加 Direct-zol wash buffer 400 微升到柱子上 离心,去除滤出液。
e) 添加 RNA wash buffer 700 微升到柱子上 离心,去除滤出液。
f ) 直接添加 50 µl of DNase/RNase-Free Water 到柱基质上,下面套上一个干净的 1.5 毫升 EP 管离心收集 RNA.


编辑: littleadvance
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