其他的步骤没问题。问题是如何将第一次离心后的菌体悬浮?书上说不能剧烈振荡,否则影响转化的效率。可是不剧烈的话,无法将菌体悬浮,怎么办?
有一个诀窍就是离心的速度不能太高,如果用大型的离心机,转速在3 500-4 000 rpm 5-10分钟就可以了,只要你能把菌体离下就可以,不要太长时间,这样你的菌会很松,加上一些CaCl2轻轻弹几下就开了,再慢慢弹,慢慢摇, 包你很快做好。这是经验,试试吧。
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