o8G修饰的circPLCE1通过分子伴侣介导的自噬抑制肺癌进展

背景：肺癌严重威胁人类健康，但其分子机制仍不清楚。环状RNA（circRNA）与肿瘤进展密切相关，而8-氧鸟嘌呤（o8G）修饰在调控RNA命运中的重要作用已逐渐被揭示。然而，circRNA的o8G修饰尚未见报道。我们鉴定了circPLCE1，其在肺癌中显著下调，并进一步研究了circPLCE1的o8G修饰及其在肺癌进展中的相关机制。方法：我们通过RNA高通量测序鉴定了差异表达的circRNA，然后进行了甲基化RNA免疫沉淀（MeRIP）、免疫荧光（IF）分析、交联免疫沉淀（CLIP）和放线菌素D（ActD）实验，以探索circPLCE1的o8G修饰。通过建立circPLCE1沉默/过表达系统，阐明了circPLCE1在体内外的生物学功能。使用标记RNA亲和纯化（TRAP）、RNA免疫沉淀（RIP）和免疫共沉淀（Co-IP）实验，以及pSIN-PAmCherry-KFERQ-NE报告基因，阐明了circPLCE1抑制肺癌进展的分子机制。结果：本研究揭示活性氧（ROS）可诱导circPLCE1的o8G修饰，且AUF1可介导circPLCE1稳定性的降低。我们发现circPLCE1在体内外均能显著抑制肺癌进展，其表达与肿瘤分期和预后相关。分子机制被阐明：circPLCE1靶向HSC70蛋白，增加其泛素化水平，通过分子伴侣介导的自噬（CMA）途径调节ATG5依赖性巨自噬，最终抑制肺癌进展。结论：o8G修饰的circPLCE1通过CMA抑制巨自噬并改变细胞命运，从而抑制肺癌进展。该研究不仅为阐明肺癌进展的分子机制提供了新的理论基础，也为肺癌治疗提供了潜在靶点。