全基因组CRISPR-Cas9筛选揭示肿瘤细胞中B7-H3的新型调控因子

背景：尽管基于B7同源3蛋白（B7-H3）的免疫治疗取得了进展，但耐药性的发展仍然是主要的临床问题。B7-H3表达的异质性和缺失是靶向治疗耐药和治疗失败的主要原因，这揭示出阐明B7-H3表达调控机制的迫切需求。在本研究中，我们识别并探索了转录因子SPT20同源物（SP20H）在B7-H3表达和肿瘤进展中的关键作用。方法：在这里，我们进行了基于CRISPR/Cas9的全基因组功能缺失筛选，以识别人类卵巢癌细胞中B7-H3的调控因子。通过RNA测序揭示了SP20H敲除所改变的信号通路。通过体外功能缺失和功能获得实验验证了SP20H在B7-H3表达中的调控作用和机制。在荷瘤小鼠中评估了抑制SP20H对肿瘤生长和抗B7-H3治疗疗效的影响。结果：我们在多种癌细胞中鉴定出SUPT20H（SP20H）为B7-H3的负调控因子，eIF4E为正调控因子。此外，我们提供的证据表明，肿瘤细胞中SP20H缺失或TNF-α刺激均能组成性激活p38 MAPK-eIF4E信号通路，从而上调B7-H3表达。SP20H缺失在体外和体内均上调了B7-H3的表达。此外，SP20H的缺失显著抑制了肿瘤生长，并增加了肿瘤微环境中免疫细胞的浸润。更重要的是，与对照组相比，靶向B7-H3的抗体-药物偶联物对SP20H缺陷型肿瘤表现出优越的抗肿瘤性能。结论：p38 MAPK-eIF4E信号通路的激活是肿瘤细胞中转录起始和B7-H3蛋白表达的关键事件。基因靶向SP20H可上调靶抗原表达，并使肿瘤对抗B7-H3治疗敏感。总的来说，我们的发现为B7-H3表达的机制提供了新的见解，并为现有的基于抗体的B7-H3靶向治疗引入了一个潜在的协同靶点。