糖酵解驱动Toll样受体配体诱导的肝窦内皮细胞成熟和免疫激活

背景与目的：肝窦内皮细胞（LSECs）是肝脏驻留的抗原提呈细胞，可诱导免疫耐受，这一特性被持续存在的病毒所利用。Toll样受体（TLR）配体可以克服这种耐受，但代谢重编程是否构成LSEC激活的基础仍未知。我们研究了TLR配体诱导的LSECs功能变化是否需要糖酵解，并探讨了其潜在机制。方法：从野生型和慢性乙型肝炎病毒（HBV）复制小鼠中分离的LSECs用TLR2配体P3C或TLR9配体ODN1826刺激。评估了LSEC成熟、细胞因子产生和T细胞启动能力。通过代谢组学和Seahorse分析测量糖酵解通量。使用糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG），并检查了mTORC1通路的参与。结果：TLR2配体P3C促进LSEC成熟，而TLR9配体ODN1826增强IL-12产生。两种配体均增强了LSEC诱导的T细胞应答。在从慢性HBV复制小鼠模型中分离的LSECs中，P3C和ODN1826也诱导成熟并增强T细胞激活能力，尽管程度较弱。代谢组学和Seahorse分析显示，TLR2/9配体增强了LSECs中的糖酵解和氧化磷酸化，并伴随mTORC1/HIF-1α/c-Myc轴的激活。在野生型和慢性HBV模型中，用2-DG阻断糖酵解显着降低了P3C刺激的LSECs上共刺激分子的表达和ODN1826刺激的LSECs产生IL-12。机制上，2-DG抑制了mTORC1通路，从而减弱了TLR配体诱导的反应。结论：TLR配体诱导的LSEC激活和促炎功能关键依赖于通过mTORC1信号通路的糖酵解。这揭示了在固有刺激过程中LSEC免疫调节的关键代谢机制。