阿魏酸通过靶向Grp78和Perk-eIF2α-ATF4-CHOP通路减轻内质网应激，缓解化疗诱导的早发性卵巢功能不全

背景：早发性卵巢功能不全（POI）是一种以卵巢功能过早衰退、闭经和不孕为特征的临床综合征。阿魏酸（FA）是来源于传统中药当归和川芎的 prominent 生物活性酚类化合物。这些草药常用于治疗月经不调和不孕等妇科疾病，并已知可调节内质网（ER）应激。然而，FA在POI中的治疗潜力和分子机制仍未充分探索。本研究旨在探讨FA对POI的保护作用并阐明其潜在药理机制。方法：在体内，通过一次性腹腔注射环磷酰胺（CTX；120 mg/kg）建立POI小鼠模型，并连续灌胃FA 28天观察其治疗效果。通过激素水平、卵泡发育和氧化应激（OS）水平评估卵巢功能和病理变化。在体外，使用4-氢过氧环磷酰胺（4-OHCP）处理的KGN颗粒细胞研究FA的作用。采用转录组测序、分子对接和分子动力学模拟来鉴定FA的潜在靶点。结果：我们的研究结果表明，FA给药有助于维持规律的发情周期，促进卵泡发育和激素分泌，并减轻卵巢组织和颗粒细胞（GCs）中的OS。转录组学分析结合分子对接和分子动力学模拟提示FA可能靶向关键的内质网应激蛋白，特别是Grp78和Perk。进一步的体内和体外实验证实，FA通过抑制Perk/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路的过度激活来减轻内质网应激。值得注意的是，FA的保护作用与内质网应激抑制剂4-苯基丁酸（4-PBA）相当，并被内质网应激激活剂衣霉素（TM）逆转。此外，FA下调ERO1α表达，进一步阻断内质网应激引发的继发性氧化损伤。在KGN细胞中，FA显著抑制4-OHCP诱导的凋亡，并上调抗凋亡蛋白BCL-2和BCL-xL，其疗效与4-PBA相似。结论：FA通过协调调节OS和内质网应激、抑制Perk/eIF2α/ATF4/CHOP通路以及抑制GC凋亡来改善CTX诱导的POI小鼠的卵巢功能。这些发现为FA作为POI的潜在治疗候选药物提供了实验证据。