METTL3依赖的LGMN mRNA N6-甲基腺苷修饰促进巨噬细胞铁死亡和动脉粥样硬化

N6-甲基腺苷（m6A）修饰在多种生物过程中发挥重要作用，但其在巨噬细胞中的功能及其与铁死亡在促进动脉粥样硬化（AS）中的潜在联系仍不清楚。本研究发现，小鼠AS动脉中m6A修饰水平和甲基转移酶样3（METTL3）表达升高。小鼠和人类AS动脉中METTL3阳性巨噬细胞数量增加。系统性抑制或巨噬细胞特异性敲低METTL3可减轻小鼠AS斑块形成。RNA测序显示，在骨髓源性巨噬细胞（BMDM）中敲低METTL3后，铁死亡相关基因富集。与此一致，抑制铁死亡也减少了AS斑块。进一步分析显示，小鼠AS动脉中legumain（LGMN）的m6A修饰和表达增加。在氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）处理的BMDM和AS病变内的巨噬细胞中也检测到LGMN表达升高。在BMDM中敲低LGMN可减轻ox-LDL诱导的铁死亡、脂质沉积和炎症反应。小鼠巨噬细胞特异性敲低LGMN可减少AS动脉中的斑块形成和铁死亡。此外，巨噬细胞特异性敲低METTL3可抑制AS动脉中LGMN表达的上调。ox-LDL对BMDM的作用可被METTL3敲低消除，但被LGMN过表达挽救。机制上，YTHDF1与m6A甲基化的LGMN mRNA结合并增强其翻译。总之，体内和体外结果表明，LGMN通过将METTL3依赖的m6A修饰与巨噬细胞铁死亡联系起来，作为AS的新型中介因子。