可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体通过RAGE促进脓毒症急性肾损伤中的内质网应激和凋亡易感性

背景：急性肾损伤（AKI）是危重患者的常见并发症，与不良结局风险增加相关。迫切需要新的生物标志物以协助AKI的早期检测和管理。可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（suPAR）是一种炎症相关、免疫来源的分子，参与包括肾脏疾病在内的多种疾病的发病机制。方法：我们在124名入住重症监护室（ICU）的患者中评估了血清suPAR水平诊断AKI的能力。此外，进行了体内和体外实验以探讨suPAR与AKI发展之间的潜在机制。我们用suPAR刺激HK-2细胞以研究其对HK-2细胞的影响。此外，使用受体抑制剂、蛋白质对接和免疫共沉淀等方法研究suPAR如何作用于HK-2细胞。我们进一步探讨了uPAR单克隆抗体是否能减轻脓毒症小鼠的急性肾损伤。结果：我们发现AKI患者血清suPAR水平显著升高。此外，AKI小鼠肾皮质中总suPAR/uPAR升高，血清suPAR水平也升高。体外细胞实验证明，suPAR刺激促进HK-2细胞内质网应激（ER应激）和凋亡相关蛋白的表达，并增加细胞内活性氧（ROS）。一致地，腹腔注射重组suPAR的小鼠肾皮质也表现出ER应激升高。此外，我们发现suPAR与晚期糖基化终末产物受体（RAGE）发生免疫共沉淀，且FITC标记的重组suPAR与HK-2细胞上的RAGE荧光共定位，表明RAGE参与suPAR的信号转导。另外，蛋白质对接结果显示suPAR可通过氢键与RAGE形成蛋白质-蛋白质复合物。uPAR单克隆抗体预处理可减轻脓毒症小鼠的肾损伤，并降低脓毒症AKI小鼠肾脏中ROS、凋亡和内质网应激的水平。结论：我们的研究表明，高水平的suPAR与AKI的发生呈正相关。suPAR促进肾小管上皮细胞内质网应激并增加凋亡易感性。细胞膜上的RAGE可与suPAR结合，参与suPAR介导的内质网应激通路和凋亡相关蛋白表达的激活。uPAR单克隆抗体预处理可减轻脓毒症小鼠的急性肾损伤。