协同靶向NF-κB增强Alisertib和Donafenib驱动的铁死亡在肝细胞癌治疗中的作用

背景：肝细胞癌（HCC）是全球癌症相关死亡的主要原因。它通常在晚期被诊断，这限制了治疗选择。尽管多纳非尼是晚期HCC的标准疗法，但其疗效常因治疗失败而降低。Alisertib，一种Aurora-A激酶抑制剂，在增强多纳非尼的细胞毒性作用方面显示出前景。本研究探讨了这两种药物的联合治疗效果。方法：通过CCK-8和集落形成实验评估协同细胞毒性。通过流式细胞术、脂质过氧化以及活性氧（ROS）、细胞内Fe2+和GSH/GSSG的测量来量化铁死亡激活。机制研究涉及NF-κB/p65定位的免疫荧光，以及蛋白质印迹、qPCR和双荧光素酶报告基因实验以评估蛋白质和基因表达。进行染色质免疫沉淀（ChIP）实验以分析NF-κB/p65与其内源启动子的结合。建立体内异种移植瘤以评估联合治疗的抗肿瘤疗效和潜在副作用，并通过组织学和免疫组织化学分析支持。结果：最佳协同浓度（Alisertib 2.5 µM + Donafenib 10 µM用于HCCLM3；5 µM用于Huh7）诱导了深刻的铁死亡级联反应，表现为ROS、脂质过氧化物和Fe2+积累升高，同时GSH耗竭。联合治疗有效抑制p65核转位，同时稳定IκBα，从而抑制NRF2介导的抗氧化转录。异种移植模型显示肿瘤体积显著减少，器官结构和血液学参数保持正常，证实了临床可转化性。结论：Alisertib被确定为Donafenib诱导的铁死亡的强效增强剂，通过抑制NF-κB/NRF2通路。这提出了一种通过抑制NF-κB靶向铁死亡的新型组合策略。需要进一步研究将这些有希望的结果转化为临床实践。