芦丁通过AMPK/NFE2L2信号通路减轻H2O2介导的牛乳腺上皮细胞氧化应激、炎症、内质网应激和凋亡

过渡期奶牛面临严重的氧化应激，通过相互交织的氧化、炎症和内质网应激通路破坏乳腺上皮稳态。本研究假设天然类黄酮芦丁通过激活AMPK/NFE2L2信号通路减轻过氧化氢（H2O2）诱导的牛乳腺上皮细胞（BMECs）氧化损伤。本研究中，BMECs用芦丁预孵育，随后用或不用H2O2处理。此外，通过用NFE2L2 siRNA（siNFE2L2）转染BMECs，研究了芦丁介导的AMPK/NFE2L2信号通路如何预防H2O2诱导的氧化损伤。结果表明，在芦丁培养物中，H2O2诱导的细胞活性氧（ROS）增加、炎性细胞因子表达、内质网应激相关蛋白表达和凋亡率均得到减弱。H2O2挑战导致AMPK和NFE2L2相关蛋白丰度降低。相比之下，这些效应在芦丁培养物中得到逆转。转染siNFE2L2逆转了芦丁的保护作用，表明NFE2L2对芦丁的保护机制至关重要。这些结果阐明了芦丁通过AMPK/NFE2L2信号通路抵抗H2O2介导的氧化损伤的分子机制，并提示其可作为反刍动物在应激期（如产犊前后）的强效体内抗氧化剂。