Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9)

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Applications	Reactivity	Sensitivity	MW (kDa)	Isotype
W IP IHC-P	H M R Hm Mk Dm Sc (C) (B) (Pg)	Endogenous	62	Rabbit IgG

Protocols
2535: IHC / Paraffin , Immunoprecipitation , Western Blotting

特异性/敏感性

Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb 检测仅当苏氨酸172磷酸化后的内源 AMPKα。该抗体可检测催化亚基的 α1 和 α2 同工型，但不能检测 β 或 γ 调节亚基。

来源/纯化
使用与人 AMPKα 蛋白 Thr172 周围残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

Western Blotting

使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb（上）或 AMPKα Antibody #2532（下），对未经处理或经寡霉素处理 (0.5 µM) 的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

IHC-P (paraffin)

使用 Phospho-AMPKα (T172) (40H9) Rabbit mAb，对对照（左）或经苯乙双胍处理（右）的石蜡包埋的 NCI-H228 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

背景

AMP 激活的蛋白激酶 (AMPK) 从酵母到植物和动物中都高度保守，且在调节能量平衡方面发挥关键作用 (1)。AMPK 蛋白以一种异三聚体复合体的形式存在，由一个 α-催化亚基、一个 β-调节亚基和一个 γ-调节亚基组成，每个亚基被两到三个不同基因编码 (α1、2；β1、2；γ1、2、3) (2)。该激酶会被因细胞和环境压力引起AMP/ ATP 比值升高而激活，如热休克，缺氧和缺血 (1)。抑癌基因 LKB1 与辅助蛋白 STRAD 和 MO25 一同将位于活化环里 Thr172 位点的 AMPKα 磷酸化，该位点的磷酸化是 AMPK 激酶活性所必需的 (3-5)。AMPKα 在 Thr258 位点和 Ser485 位点（对于 α1；α2 是 Ser491 位点）也被磷酸化。上游激酶以及这些磷酸化事件的生物学意义尚未被阐明 (6)。β1 亚基是通过豆蔻酰化和多位点磷酸化翻译后修饰的，这些位点包括 Ser24/25 位点、Ser96 位点、Ser101 位点、Ser108 位点和 Ser182 位点 (6,7)。β1 亚基 Ser108 位点的磷酸化似乎对 AMPK 酶活性是必要的，而 Ser24/25 位点和 Ser182 位点的磷酸化会影响 AMPK 定位 (7)。已确定了一些 AMPKγ 亚基的突变，其中大部分位于假定的 AMP/ ATP 结合位点（CBS 或Bateman域）。这些位点的突变导致 AMPK 活性降低，引起心脏或骨骼肌糖原积累 (1,2)。越来越多证据表明，AMPK 不仅调节脂肪酸和糖原的代谢，也通过 EF2 和 TSC2/mTOR 通路调节蛋白质合成和细胞生长，另外还通过 eNOS / nNOS 调节血流量 (1)。

1. Hardie, D.G. (2004) J Cell Sci 117, 5479-87.
2. Carling, D. (2004) Trends Biochem Sci 29, 18-24.
3. Hawley, S.A. et al. (1996) J Biol Chem 271, 27879-87.
4. Lizcano, J.M. et al. (2004) EMBO J 23, 833-43.
5. Shaw, R.J. et al. (2004) Proc Natl Acad Sci U S A 101, 3329-35.
6. Woods, A. et al. (2003) J. Biol. Chem. 278, 28434-28442.
7. Warden, S.M. et al. (2001) Biochem J. 354, 275-283.
8. Hadad, S.M. et al. (2009) BMC Cancer 9, 307.
9. Kim, E.K. et al. (2004) J Biol Chem 279, 19970-6.

Companion Products

• 2603 AMPKα (23A3) Rabbit mAb
• 2793 AMPKα (F6) Mouse mAb
• 2532 AMPKα Antibody
• 4188 Phospho-AMPKα (Thr172) (D79.5E) Rabbit mAb
• 2531 Phospho-AMPKα (Thr172) Antibody
• 4184 Phospho-AMPKα1 (Ser485) Antibody
• 4185 Phospho-AMPKα1 (Ser485)/AMPKα2 (Ser491) Antibody
• 4181 Phospho-AMPKβ1 (Ser108) Antibody
• 4182 AMPKβ1 Antibody
• 4186 Phospho-AMPKβ1 (Ser182) Antibody
• 4187 AMPKγ1 Antibody
• 2536 AMPKγ2 Antibody
• 3661 Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) Antibody
• 3662 Acetyl-CoA Carboxylase Antibody
• 9944 AICAR
• 7071 Phototope^® -HRP Western Blot Detection System, Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody
• 7074 Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody
• 7720 Prestained Protein Marker, Broad Range (Premixed Format)
• 7727 Biotinylated Protein Ladder Detection Pack
• 7003 20X LumiGLO^® Reagent and 20X Peroxide
• 2550 AMPKγ3 Antibody
• 4150 AMPKβ1/2 (57C12) Rabbit mAb
• 4148 AMPKβ2 Antibody
• 2795 AMPKα1 Antibody
• 2537 Phospho-AMPKα1 (Ser485) (45F5) Rabbit mAb
• 9158 AMPK Control Cell Extracts
• 9996 Oligomycin
• 8114 SignalStain^® Boost IHC Detection Reagent (HRP, Rabbit)
• 5425 Normal Goat Serum
• 9997 Tris Buffered Saline with Tween 20 (TBST-10X)

Rabbit Monoclonals Produced Using Epitomics® Technology, U.S. Patent No. 5,675,063.

应用缩写：W-Western IP-免疫沉淀法 IHC-免疫组织化学法 ChIP-染色质免疫沉淀法 IF-免疫荧光法 F-流式细胞术 E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写：H-人 M-小鼠 R-大鼠 Hm- 仓鼠 Mk-猴子 Mi-水貂 C-鸡 Dm-黑腹果蝇 X-爪蟾 Z-斑马鱼 B-牛 DG-狗 PG-猪 Sc-酿酒酵母 Ce-秀丽隐杆线虫 Hr-马 All-预期所有物种

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
XP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
DRAQ5 是 Biostatus Limited 的注册商标。