二至丸逆转黑色素瘤微环境中PD-L1介导的免疫抑制

背景：旨在激活免疫系统的癌症免疫疗法，特别是通过阻断免疫检查点，已成为治疗晚期癌症患者的成功方式。然而，其临床实践常因高成本、低初始应答率和严重副作用而受到限制。需要新的策略来补充和推进这种生物疗法。二至丸（EZP）具有多种药理作用，包括免疫调节、抗肿瘤和抗衰老。我们假设EZP可以通过免疫调节发挥其抗肿瘤作用。目的：本研究旨在探讨EZP的抗肿瘤活性，并明确其分子机制。方法：通过应用具有高免疫浸润的黑色素瘤模型，我们确定了EZP的抗黑色素瘤作用。为了确定这种作用是否通过直接靶向肿瘤细胞介导，在体外检查了细胞活力和凋亡。使用网络药理学分析预测EZP通过免疫反应对黑色素瘤的潜在机制。进行了流式细胞术、免疫组织化学（IHC）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和结晶紫（CV）实验来检测EZP介导的T细胞浸润和功能。通过体内和体外的蛋白质印迹进一步研究了EZP的机制。结果：给予EZP显著抑制了肿瘤重量和体积。EZP提取物只能略微降低细胞活力并诱导黑色素瘤凋亡。网络药理学分析预测JAK-STAT信号通路和T细胞受体信号通路可能参与EZP治疗。流式细胞术和IHC分析显示，EZP增加了CD4+ T细胞的数量，并增强了CD8+ T细胞的功能。在共培养实验中，EZP提高了T细胞的杀伤能力。蛋白质印迹显示，EZP处理降低了PD-L1信号通路。结论：这些发现表明，EZP通过诱导凋亡和阻断PD-L1以激活T细胞来发挥抗黑色素瘤作用。EZP可能代表一种有前景的癌症免疫治疗候选药物。