EHMT2通过表观遗传沉默APC表达促进肝细胞癌的发病机制

背景：肝细胞癌（HCC）是全球癌症死亡的第二大原因，仅在中国，根据2009年至2011年的平均年发病率，就占新发癌症病例的一半以上（466,100例）和422,100例死亡。由于HCC发展背后的机制不清楚且复杂，有效的HCC治疗仍然不可用。Wnt–β-catenin通路是HCC发病机制的关键因素：40-70%的HCC患者肿瘤中存在β-catenin蛋白的核积累。然而，β-catenin激活的机制尚未完全明了。方法：通过瞬时转染携带EHMT2特异性小导向RNA（sgRNA）序列的pX459质粒，在Hep3B和Huh1细胞中实现EHMT2的敲除。所有实验均进行三次重复，并重复超过三次。结果：在本研究中，我们观察到与正常对照相比，EHMT2（而非EHMT1）的mRNA和蛋白水平在HCC中显著升高。接下来，在野生型和EHMT2−/− Hep3B和Huh1癌症干细胞中进行的Ki67染色、MTT、软琼脂和异种移植实验的结果共同揭示，EHMT2表达的升高是HCC肿瘤发生所必需的。同时，我们发现EHMT2表达的升高有助于Wnt–β-catenin信号的激活：在Hep3B或Huh1细胞中敲除EHMT2促进了β-catenin的细胞质定位，并抑制了Wnt–β-catenin信号靶标如Myc、CCND1、MMP-7等的表达。我们证明了EHMT2直接介导APC启动子的H3K9me2甲基化以表观遗传沉默其表达。更有趣的是，我们的发现还表明，UNC0642，一种EHMT2的特异性抑制剂，在体外和体内均显示出抗肿瘤发生效应，而这些效应在Hep3B和Huh1细胞中通过敲除EHMT2或过表达APC而大部分被消除。结论：总之，我们的观察强调EHMT2–APC轴是HCC中Wnt–β-catenin通路激活的关键贡献者，UNC0642可能是HCC靶向药物治疗的潜在候选药物。