坤奎保肾汤在糖尿病肾病中的肾保护机制：靶向HERC2/NCOA4介导的自噬依赖性铁死亡通路

背景：糖尿病肾病（DKD）是全球慢性肾脏病的主要致病因素。临床研究表明，坤奎保肾汤（KKBS）可有效减少DKD患者的蛋白尿并改善肾功能。然而，其确切的分子靶点和治疗机制仍有待充分阐明。目的：评估KKBS在DKD中的肾保护功效并探讨其潜在的作用机制。方法：采用液相色谱-串联质谱法分析KKBS的化学成分。进行代谢组学和转录组学分析以确定与KKBS对DKD治疗效果相关的关键靶点和通路。在高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2）和db/db小鼠中评估KKBS的肾保护作用。进行了多种检测，包括细胞计数试剂盒-8、Western blot、定量逆转录聚合酶链反应、免疫荧光、免疫共沉淀、过碘酸雪夫染色、Masson染色、苏木精-伊红染色、免疫组织化学和线粒体形态分析。结果：在KKBS的代谢组学分析中，谷胱甘肽代谢通路是最突出的代谢通路。转录组学和生物信息学分析显示，核受体辅激活因子4（NCOA4）在DKD小鼠肾小管铁死亡的调控中起重要作用。体内外实验均表明，KKBS可改善肾功能障碍，减轻肾组织损伤，并抑制自噬依赖性铁死亡标志物和炎症性纤维化的表达。机制上，KKBS增强了HERC2（与E6-AP C端同源且含RCC1样结构域的E3泛素蛋白连接酶）与NCOA4之间的相互作用，导致NCOA4发生K48相关泛素化并随后降解。该过程抑制了自噬依赖性铁死亡，减少了促纤维化炎症因子的释放，并最终在DKD中发挥抗纤维化作用。结论：KKBS通过调节HERC2/NCOA4介导的自噬依赖性铁死亡来发挥对DKD的肾保护作用，从而减轻肾纤维化。