新绿原酸抗肝细胞癌作用的机制研究：体外和体内实验

背景：新绿原酸（NCA）是一种天然存在的多酚类化合物，具有多种生物活性。本研究旨在探讨NCA对人肝细胞癌（HCC）细胞的抑制活性，并阐明其潜在的分子机制。方法：采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测NCA对人HCC细胞系HepG2和Huh-7的抗增殖活性。采用流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期分布。采用伤口愈合实验评估NCA对细胞迁移的影响。对NCA处理和未处理的Huh-7细胞进行转录组测序，以鉴定差异表达基因（DEGs）和信号通路。采用Western blot验证关键凋亡相关蛋白的表达。体内实验采用裸鼠异种移植模型评估NCA的抗肿瘤作用。结果：NCA显著抑制HepG2和Huh-7细胞的增殖，24小时半数抑制浓度（IC50）值分别为345.5和231.8 µM，48小时分别为244.0和199.2 µM。流式细胞术显示NCA诱导细胞凋亡和G1期细胞周期阻滞。伤口愈合实验表明NCA有效抑制HCC细胞迁移。转录组分析显示，NCA处理的Huh-7细胞中有2,297个DEGs（Padj<0.01），其中1,162个上调，1,135个下调。通路富集分析表明，与“Alcoholism”、“MicroRNAs in cancer”、“Hepatocellular carcinoma”和“TGF-beta signaling pathway”相关的通路显著富集。Western blot证实促凋亡蛋白[BCL2-associated X protein (BAX)；cysteinyl aspartate specific proteinase 3 (CASP3)、BH3 interacting domain death agonist (BID)和cytochrome C (CYCS)]上调，抗凋亡蛋白B-cell lymphoma 2 (BCL2)下调。在体内，NCA治疗显著抑制肿瘤生长。结论：本研究提供了有力的证据，表明NCA通过诱导凋亡和细胞周期阻滞在体外和体内抑制HCC细胞生长和迁移。转录组分析显示，NCA诱导HCC细胞内转录网络和代谢通路的广泛变化，凸显其作为HCC有前景的治疗策略的潜力。