知母皂苷AIII通过引起氧化应激和阻断自噬流抑制胃癌

背景：胃癌是全球常见的恶性肿瘤，治疗靶点有限。知母皂苷AIII是从知母中分离的天然甾体皂苷，本研究首次证实了Tim AIII的抗胃癌作用。方法：采用MTT实验、细胞周期分析和划痕实验评价Tim AIII对胃癌细胞（AGS和HGC27）的抑制作用。通过检测活性氧和丙二醛以及Kelch样ECH相关蛋白1-核因子E2相关因子2通路来评价氧化应激。利用RNA测序和蛋白质组学分析深入研究分子机制。使用透射电子显微镜追踪自噬流，检测自噬相关通路蛋白的变化，用LC3B和溶酶体染色。在正常胃黏膜上皮细胞（GES-1）上进行细胞活力、氧化应激和自噬水平的平行对照实验。最后，采用裸鼠皮下移植瘤模型评价体内抗胃癌能力。结果：Tim AIII抑制胃癌细胞的活力、增殖和迁移。Tim AIII通过增加细胞内ROS和MDA水平并抑制Keap1-Nrf2通路引起胃癌细胞氧化应激。RNA测序和蛋白质组学分析主要关注胃癌细胞中自噬相关通路和溶酶体。Tim AIII激活自噬，表现为自噬体数量增加、PI3K-AKT通路抑制和AMPK通路激活。然而，Tim AIII抑制自噬体-溶酶体融合并损害溶酶体功能，导致胃癌细胞自噬流阻断。将本研究中显著抑制胃癌细胞的Tim AIII浓度应用于GES-1细胞，结果显示在该浓度下，Tim AIII对GES-1细胞无明显细胞毒性作用，不诱导氧化应激，也不影响自噬。最后，Tim AIII在体内也具有抑制肿瘤生长的能力。意义：总之，我们的研究结果表明Tim AIII是一种新型晚期自噬抑制剂，可能为胃癌提供新的治疗可能性。