ACK1凝聚体促进肺鳞状细胞癌中的STAT5信号传导

背景：ACK1是一种非受体酪氨酸激酶，磷酸化参与癌症进展的各种底物。其致癌活性由基因扩增、突变和翻译后修饰驱动。然而，调控ACK1活性的其他机制仍有待充分了解。液-液相分离（LLPS）已成为细胞区室化的关键机制，控制信号通路的时空动态。方法：使用分子克隆技术生成表达质粒和相应突变体。通过蛋白质印迹、免疫荧光和共聚焦显微镜评估蛋白质表达和定位。使用延时成像、光漂白、optoDroplet测定和体外液滴形成测定评估LLPS特性。通过集落形成和伤口愈合测定检查细胞功能。通过蛋白质印迹、免疫共沉淀（Co-IP）、免疫荧光、RNA测序（RNA-Seq）和基因集富集分析（GSEA）评估STAT5信号激活。结果：我们证明ACK1在肺鳞状细胞癌（LUSC）中频繁扩增和过表达。在LUSC细胞中，ACK1经历LLPS，该过程依赖于 intrinsically disordered region（IDR，96–156 aa），但与其激酶活性无关。我们确定IDR诱导液滴形成，其中143–156 aa片段对此活性至关重要。此外，我们的数据揭示ACK1在LUSC细胞中磷酸化STAT5。ACK1凝聚体招募非催化衔接蛋白NCK1和NCK2，并增强STAT5信号。这些凝聚体促进STAT5核定位和转录活性，从而促进LUSC细胞生长和迁移。结论：我们的发现突显了ACK1凝聚体在致癌STAT5信号中的关键作用，并提示靶向ACK1凝聚体的形成可能成为LUSC的潜在治疗策略。