从SphK1抑制剂SKI II培养基中分离的细胞外囊泡抑制结直肠癌的迁移。

背景 结直肠癌是一种对人类健康特别有害的慢性疾病。尽管对结直肠癌和细胞外囊泡（EVs）已有许多研究，但尚不清楚鞘氨醇激酶1（SphK1）的抑制剂SKI II是否利用EVs作为载体抑制结直肠癌的迁移。本研究旨在探讨从SphK1抑制剂SKI II培养基中分离的EVs是否影响结直肠癌细胞的E-钙黏蛋白和波形蛋白表达及细胞迁移。 方法 使用外泌体提取纯化试剂盒从RKO细胞中提取EVs，并对提取的EVs进行鉴定，以评估该试剂盒提取的EVs是否符合实验要求。从RKO无外泌体血清培养基中提取RKOEVs，从添加SKI II干预的RKO无外泌体血清培养基中提取RKO-SKEVs。将PKH67标记的EVs加入细胞。使用EVs抑制剂GW4869、RKOEVs和RKO-SKEVs干预RKO细胞，使用RKOEVs和RKO-SKEVs干预HT29细胞。通过Western blotting检测E-钙黏蛋白和波形蛋白表达。使用Transwell实验检测细胞迁移能力。 结果 与对照组相比，GW4869处理后，E-钙黏蛋白升高，波形蛋白降低，迁移细胞数减少。RKOEVs干预后，E-钙黏蛋白、波形蛋白和细胞迁移数的变化相反。与RKOEVs干预RKO细胞相比，RKO-SKEVs干预后E-钙黏蛋白升高，波形蛋白降低，迁移细胞数减少。同样，与RKOEVs干预HT29细胞相比，RKO-SKEVs干预后E-钙黏蛋白升高，波形蛋白降低，迁移细胞数减少。 结论 从SphK1抑制剂SKI II培养基中分离的EVs影响结直肠癌中E-钙黏蛋白和波形蛋白的表达，并抑制细胞迁移。