N6-甲基腺苷修饰的SRPK1通过PKM剪接促进肺腺癌的有氧糖酵解

背景：RNA N6-甲基腺苷（m6A）修饰已成为表观遗传调节的重要热点。丝氨酸/精氨酸蛋白激酶1（SRPK1）与多种癌症的发病机制相关。然而，SRPK1的m6A修饰及其与肺腺癌（LUAD）机制的关系仍不清楚。方法：采用Western blotting和聚合酶链反应（PCR）分析鉴定基因和蛋白表达。利用m6A表观转录组芯片评估m6A谱。通过功能丧失和获得实验阐明METTL3和SRPK1对LUAD糖酵解和肿瘤发生的影响。采用RNA免疫沉淀（RIP）、m6A RNA免疫沉淀（MeRIP）和RNA稳定性实验阐明SRPK1在LUAD中METTL3介导的m6A修饰机制。应用代谢定量和免疫共沉淀实验研究SRPK1介导LUAD代谢的分子机制。结果：表观转录组芯片分析显示，SRPK1在LUAD中可能被高甲基化并上调。主要转甲基酶METTL3上调并诱导SRPK1异常高的m6A水平。机制上，SRPK1的m6A位点被METTL3直接甲基化，这也以IGF2BP2依赖的方式稳定了SRPK1。甲基化的SRPK1随后通过增强糖酵解促进LUAD进展。进一步的代谢定量、免疫共沉淀和Western blot分析显示，SRPK1与hnRNPA1（PKM剪接的重要调节因子）相互作用，从而通过上调LUAD中的PKM2促进糖酵解。然而，METTL3抑制剂STM2457可以通过抑制LUAD中的SRPK1和糖酵解来逆转上述效应。结论：在LUAD中，异常表达的METTL3通过m6A-IGF2BP2依赖机制上调SRPK1水平。METTL3诱导的SRPK1通过增强糖酵解促进LUAD细胞增殖，METTL3的小分子抑制剂STM2457可能成为LUAD患者的替代新治疗策略。