TIMELESS促进口腔鳞状细胞癌葡萄糖代谢的重编程

背景：口腔鳞状细胞癌（OSCC）是口腔最常见的恶性肿瘤，具有高发病率和低存活率的特点。新出现的证据表明昼夜节律紊乱与癌症发展之间存在联系。昼夜节律基因TIMELESS以其在多种肿瘤中的特异性表达而闻名，但在OSCC中的研究尚不充分。本研究旨在探讨TIMELESS对OSCC的影响，重点关注细胞生长和代谢改变。方法：我们使用western blot、免疫组织化学、qRT-PCR以及癌症基因组图谱（TCGA）和癌症细胞系百科全书（CCLE）的数据分析了OSCC中TIMELESS的表达。通过克隆形成、MTS、细胞周期和EdU实验，以及裸鼠皮下肿瘤生长实验，检测了TIMELESS在OSCC中的作用。我们还通过测量葡萄糖摄取、乳酸产生、耗氧量和培养基pH值来评估TIMELESS的代谢影响，并研究其对关键代谢蛋白的影响，包括沉默信息调节因子1（SIRT1）、己糖激酶2（HK2）、丙酮酸激酶同工酶M2（PKM2）、重组乳酸脱氢酶A（LDHA）和葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）。结果：观察到OSCC组织和细胞系中TIMELESS表达升高，与患者生存期缩短相关。TIMELESS过表达增强OSCC细胞增殖，增加糖酵解活性（葡萄糖摄取和乳酸产生），并抑制氧化磷酸化（表现为耗氧量减少和pH值改变）。相反，TIMELESS敲低抑制了这些细胞和代谢过程，这种效应通过操作SIRT1水平而重现。此外，SIRT1与TIMELESS表达呈正相关。SIRT1、HK2、PKM2、LDHA和GLUT1的表达随TIMELESS过表达而增加，随TIMELESS敲低而减少。结论：TIMELESS通过调节细胞增殖和代谢途径，特别是通过增强糖酵解和减少氧化磷酸化，主要通过SIRT1通路介导，加剧OSCC进展。这凸显了TIMELESS作为OSCC治疗策略潜在靶点的可能性。