巨噬细胞Tim-3通过抑制中性粒细胞坏死性凋亡维持DSS诱导结肠炎中的肠道稳态

T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域-3（Tim-3）是一种多功能的免疫调节分子，可保护肠道免受炎症损伤。坏死性凋亡是一种调节肠道稳态和炎症的细胞死亡类型。巨噬细胞Tim-3在肠道炎症中的保护作用机制尚不清楚；因此，我们研究了巨噬细胞中特异性敲低Tim-3是否通过坏死性凋亡驱动肠道炎症。通过双重免疫荧光染色和单细胞RNA测序（sc-RNA seq）分别评估了炎症性肠病（IBD）患者和健康对照结肠组织中Tim-3蛋白和mRNA的表达。生成巨噬细胞特异性Tim-3敲除（Tim-3M-KO）小鼠，以探讨Tim-3在葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导结肠炎中的功能和机制。通过受体相互作用蛋白激酶（RIP）1、RIP3和活性氧（ROS）的药理学抑制剂阻断坏死性凋亡。此外，进行了体外实验以评估Tim-3敲低巨噬细胞诱导中性粒细胞坏死性凋亡的机制。尽管Tim-3在结肠稳态期间巨噬细胞中相对不活跃，但在结肠炎期间高度活跃。与对照组相比，Tim-3M-KO小鼠对结肠炎的易感性增加，结肠炎评分更高，促炎介质表达增加。给予RIP1/RIP3或ROS抑制剂后，DSS处理的Tim-3M-KO小鼠肠道炎症症状显著减轻。进一步分析表明，Tim-3敲低巨噬细胞中的TLR4/NF-κB通路介导了TNF-α诱导的中性粒细胞坏死性凋亡通路。巨噬细胞Tim-3通过细胞内ROS信号调节中性粒细胞坏死性凋亡。Tim-3敲低巨噬细胞可以募集中性粒细胞并诱导中性粒细胞坏死性凋亡，从而损害肠道黏膜屏障，触发结肠炎发展中的恶性循环。我们的结果表明巨噬细胞Tim-3通过抑制中性粒细胞坏死性凋亡在维持肠道稳态中发挥保护作用，并为IBD的发病机制提供了新的见解。