金丝桃苷通过抑制足细胞中AKT1介导的PANoptosis改善狼疮性肾炎：整合网络药理学与实验验证

背景：狼疮性肾炎（LN）是系统性红斑狼疮（SLE）最常见和最严重的并发症之一，由于其复杂的发病机制，治疗仍具挑战性。金丝桃苷（Hyp）是一种天然黄酮醇苷，是许多中药和草药中的关键活性成分，已通过多种信号通路显示出肾脏保护作用，有望用于LN治疗。然而，其在LN中肾脏保护作用的潜在机制，特别是对PANoptosis的调控潜力，仍未被探索。目的：本研究探讨PANoptosis在LN发病机制中的作用，重点关注蛋白激酶B（AKT1）介导的足细胞PANoptosis，以阐明Hyp的治疗机制。方法：使用SwissTargetPrediction数据库预测Hyp的潜在靶点，从GeneCards数据库获取LN相关靶点。重叠靶点被确定为潜在关键靶点，构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络以筛选核心靶点。通过DAVID数据库对这些重叠靶点进行GO和KEGG分析，以预测Hyp抗LN的机制。使用AutoDock（版本1.5.7）进行Hyp与核心靶点的分子对接，并用PyMOL进行可视化。最后，进行体内和体外实验，包括H&E染色、TUNEL染色、免疫荧光、流式细胞术、蛋白质印迹、免疫组织化学和PCR，以评估肾脏病理、细胞死亡以及关键靶点和PANoptosis标志物的mRNA/蛋白表达水平。结果：网络药理学和分子对接分析表明AKT1是Hyp和LN共有的核心靶点，Hyp与AKT1表现出稳定结合。实验验证表明，Hyp治疗抑制了MRL/lpr小鼠足细胞PANoptosis并减轻了肾损伤。机制上，Hyp通过调节PI3K/AKT轴抑制PANoptosis。AKT1过表达减弱了Hyp的治疗效果，证实了其在LN发病中的关键作用。结论：本研究揭示了AKT1介导的足细胞PANoptosis是LN的关键机制，并确立Hyp作为一种靶向该通路的有前景的治疗药物。这些发现为LN治疗提供了一种新颖且可临床转化的策略。