低强度脉冲超声对恶性黑色素瘤干细胞凋亡和自噬的时间依赖性影响

恶性黑色素瘤中的癌症干细胞（CSCs）导致治疗耐药和肿瘤复发。虽然低强度脉冲超声（LIPUS）已被提议作为一种非侵入性策略来诱导细胞死亡，但其对CSC特异性凋亡和自噬反应的影响仍不清楚。本研究旨在探讨LIPUS对CD133+黑色素瘤CSCs和CD133−非干细胞黑色素瘤细胞凋亡和自噬的时间依赖性影响。通过FACS将人黑色素瘤细胞（CHL-1）分选为CD133+和CD133−群体。细胞暴露于LIPUS（1 MHz，20%占空比，1 W/cm2）1、5和10分钟。通过免疫荧光评估Caspase-3、Caspase-8、mTOR和LC3的蛋白表达水平，并通过基于图像的分析进行量化。两种细胞群在LIPUS应用后均表现出Casp3、Casp8、mTOR和LC3强度的显著增加。值得注意的是，CD133+细胞表现出延迟但持续的Casp3和LC3表达增加，而CD133−细胞反应更快。mTOR活性在两组之间表现出明显的时间动态，表明自噬相关通路的差异调节。LIPUS在黑色素瘤CSCs和非干细胞癌细胞中触发时间上不同的凋亡和自噬反应。这些发现提示了一种利用机械刺激选择性破坏CSC存活机制的潜在治疗途径。