lncRNA NEAT1通过调控miR-486-5p/SMAD4轴促进TGF-β2刺激的晶状体上皮细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化过程

背景：晶状体上皮细胞（LECs）的异常增殖、转移和上皮-间质转化（EMT）是后发性白内障（PCO）的直接因素。核富集丰富转录本1（NEAT1）已被证明可促进细胞增殖、转移和EMT，但其是否影响PCO的进展尚不清楚。方法：采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测NEAT1、microRNA-486-5p（miR-486-5p）和果蝇母亲对抗十瘫蛋白4（SMAD4）的表达。通过3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2-H-四唑溴化物（MTT）法检测细胞增殖。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。通过western blot（WB）分析评估EMT标志蛋白、SMAD4蛋白和转化生长因子-β（TGF-β）/SMAD信号通路相关蛋白的水平。此外，通过双荧光素酶报告基因实验、RNA免疫沉淀（RIP）实验和生物素标记的RNA pull-down实验证实miR-486-5p与NEAT1或SMAD4之间的关系。结果：在PCO患者后囊膜组织和TGF-β2诱导的LECs中，NEAT1表达上调，miR-486-5p表达下调。干扰NEAT1可逆转TGF-β2对LECs增殖、迁移、侵袭和EMT的促进作用。miR-486-5p可被NEAT1海绵吸附，其抑制剂可逆转NEAT1沉默对TGF-β2诱导的LECs进展的抑制作用。SMAD4是miR-486-5p的靶标，其过表达可恢复miR-486-5p过表达对TGF-β2诱导的LECs进展的抑制作用。TGF-β/SMAD信号通路的活性受NEAT1/miR-486-5p/SMAD4轴的调控。结论：我们的研究表明，NEAT1对PCO的进展具有积极作用，有望成为PCO治疗的新靶点。