肠出血性大肠杆菌效应蛋白EspF与宿主蛋白ANXA6相互作用并触发肌球蛋白轻链激酶（MLCK）依赖的紧密连接失调

肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157:H7是一种重要的食源性病原体，可导致人类血性腹泻和溶血性尿毒症综合征（HUS）。EspF是从三型分泌系统分泌的、劫持宿主细胞功能的最具特征的效应蛋白之一。然而，感染期间关键的病原体-宿主相互作用和肠道屏障破坏的基础仍然难以捉摸。我们之前的研究筛选并验证了宿主蛋白ANXA6与EspF蛋白之间的相互作用。在此，通过荧光共振能量转移（FRET）和免疫共沉淀（CO-IP），我们验证了EspF通过其C端结构域与ANXA6相互作用。此外，我们发现EspF或ANXA6的组成性表达以及EspF-ANXA6的共表达都能降低紧密连接（TJ）蛋白ZO-1和occludin的水平，并破坏ZO-1的分布。此外，我们表明EspF-ANXA6激活了肌球蛋白轻链激酶（MLCK），诱导了肌球蛋白轻链（MLC）和PKCα的磷酸化，并下调了钙调蛋白的表达水平。总之，本研究揭示了宿主蛋白（ANXA6）与EspF之间的一种新型相互作用。EspF与ANXA6的结合可能以MLCK-MLC依赖的方式扰乱TJ，从而可能参与EHEC的致病功能。