核体蛋白ZC3H8对肿瘤表型的调控

背景：Zc3h8基因编码一个在C末端具有三个锌指基序的蛋白质。该蛋白质已被鉴定为Little Elongation Complex的一个组分，参与小核RNA的转录。ZC3H8在许多人和小鼠乳腺癌细胞系中过表达，且升高的mRNA水平与乳腺癌女性较差的预后相关。方法：我们使用RNA沉默降低小鼠乳腺肿瘤细胞中的表达水平，并在来源于正常小鼠乳腺的细胞中过表达ZC3H8。我们测量了体外细胞行为特征，包括增殖、迁移、侵袭、软琼脂生长和球体生长。我们评估了这些细胞在同基因BALB/c小鼠中形成肿瘤的能力。使用共聚焦显微镜观察细胞中的ZC3H8蛋白。结果：ZC3H8表达较低的肿瘤细胞表现出增殖速率降低、迁移较慢、通过基底膜侵袭能力减弱以及体外锚定非依赖性生长减少。ZC3H8水平较低的细胞在动物中形成更少和更小的肿瘤。在非致瘤性COMMA-D细胞中过表达ZC3H8导致相反的效果。ZC3H8蛋白定位于细胞核内的PML体和Cajal体。ZC3H8在N末端附近有一个酪蛋白激酶2（CK2）磷酸化位点，CK2抑制剂导致众多的PML体和ZC3H8聚集成少数较大的体。移除抑制剂后PML体恢复到原始状态。缺少预测的CK2磷酸化位点的突变ZC3H8显示出与野生型相似的定位和ZC3H8/PML体数量。相反，用谷氨酸替代可磷酸化的苏氨酸构建的突变体显示出显著增加的较小核灶数量。结论：这些实验表明Zc3h8表达在体外和体内促进侵袭性肿瘤细胞行为。我们的研究表明ZC3H8的完整性是维持PML体的关键。这项工作为Little Elongation Complex、PML体和癌细胞表型之间提供了联系。