YAP1介导扩展传代间充质干细胞免疫调节和治疗中的维度与化学协调

理由：间充质干细胞（MSCs）具有强大的免疫调节能力，但有时，MSCs的临床应用受到细胞功能受损和治疗效果不足的阻碍。方法：在此，使用完善的葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的结肠炎和链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病（T1D）小鼠模型来评估人脐带来源MSCs的治疗性免疫调节效果。在第5代（P5）和第15代（P15）时检测MSCs，并通过Matrigel包埋进行三维（3D）培养。进行一系列生化、组织病理学和细胞学检测以研究MSC功能和治疗性能，并通过体外与T细胞共培养和体内分析T细胞浸润到靶组织来评估免疫调节。使用RNA测序（RNA-seq）分析，随后进行免疫荧光染色、基因表达分析和化学调节来研究分子靶点。结果：在广泛扩增至P15后，MSCs丧失治疗性免疫调节作用，此时发生细胞衰老。有趣的是，在Matrigel中进行3D预处理可促进尽管广泛传代但免疫调节能力仍下降的MSCs的功能恢复，这有利于P15-MSCs在共培养中调节T细胞亚群、输注后抑制结肠和胰腺组织中促炎T细胞的浸润、改善全身炎症并减轻小鼠结肠炎和T1D。机制上，3D培养诱导MSCs转录组重编程，朝向Yes相关蛋白1（YAP1）标记的、Hippo信号通路上调的状态，并促进抗炎细胞因子转化生长因子-β1（TGF-β1）的释放。此外，临床相关药物维替泊芬（VP）和前列腺素E2（PGE2）对YAP1的化学调节影响TGF-β1表达和MSCs在维度培养过程中的免疫调节能力。结论：总之，这些发现揭示了基于YAP1的扩展MSC免疫调节的维度与化学协调，这将为精确控制的转化应用提供启示。