等离子体活化溶液通过调节间皮细胞中eNOS表达预防腹膜粘连形成

引言：腹膜粘连因治疗选择有限而导致显著的发病率。当前策略受限于疗效不一致和潜在的副作用。等离子体活化溶液（PAS）表现出抗炎和促进愈合的特性且具有良好的安全性，但其在预防腹膜粘连方面的疗效仍需进一步研究。目的：本研究旨在探讨PAS在预防腹膜粘连形成中的治疗潜力并阐明其机制。方法：建立两种小鼠腹膜粘连模型（“缺血按钮”和“盲肠-腹膜擦伤”）。人腹膜间皮细胞用LPS或TGF-β1处理以在体外模拟凋亡和间皮-间质转化（MMT）。通过流式细胞术和蛋白质印迹法定量凋亡；使用免疫荧光染色评估ROS水平。分析MMT标志物（蛋白质印迹法）和炎症细胞因子（ELISA）。组织学评估包括Masson三色染色和免疫荧光染色。结果：与PBS对照组相比，PAS-2分钟显著降低了粘连评分（缺血按钮：6.250 ± 1.389 对 2.5 ± 2.268；擦伤：7.333 ± 1.033 对 1.633 ± 1.333，p < 0.01）。在体外，PAS处理使LPS诱导的间皮细胞凋亡降低了8.14%（流式细胞术：39.10% ± 1.47% 对 30.96% ± 1.73%，p < 0.01），并抑制了MMT标志物，N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达分别降低了1.46倍（p < 0.05）和1.62倍（p < 0.05）。PAS还减轻了氧化应激，使总ROS水平降低3倍（p < 0.001），线粒体ROS（mtROS）降低2倍（p < 0.01）。机制上，PAS中的活性氮物种（RNS）恢复了eNOS的表达，减轻了间皮细胞的凋亡和MMT。结论：本研究表明，PAS通过RNS介导的eNOS恢复，抑制氧化应激、凋亡和MMT，从而预防腹膜粘连。这些发现将PAS定位为一种新颖且有前景的粘连预防疗法，值得临床转化。