聚糖对IgG1效应功能影响的多变量定量分析

新型治疗性蛋白和生物类似药的开发要求深入理解其结构与功能之间的关系。特别是，IgG糖基化如何影响其效应功能，这一点在世界卫生组织和监管机构的指南中日益被强调。我们的结果表明，仅1%的Fc去岩藻糖基化降低就可导致抗体依赖性细胞介导的细胞毒性增加超过25%。聚糖模式的相互关联性，加上工艺开发和制造样品中聚糖变异性低且缺乏明确界定的聚糖模式，使得研究单个聚糖结构的影响具有挑战性。传统的结构-功能研究方法通常依赖于一组次优的工具，例如用于实验设计的单因素一次一法（OFAT）和单变量数据分析。在这里，我们介绍一种系统性方法，用于理解和预测Fc聚糖对效应功能的影响，该方法结合了实验设计（DoE）、多变量数据分析和体外糖工程（IVGE）。这种方法遵循质量源于设计（QbD）原则，并与监管机构指南保持一致。我们应用了多种分析测定法，包括结合实验和基于细胞的实验，来研究IgG1分子上单个聚糖的影响。本研究开发的回归模型定量解释和预测了单个聚糖特征对Fcγ受体（FcγRs）结合以及治疗性蛋白生物活性的影响。据我们所知，这是首次报告系统性方法来定量理解糖基化对治疗性单克隆抗体效应功能的多变量影响，为推进治疗性蛋白开发提供了有价值的工具。