TGF-β1通过ERK-c-Fos-JunB轴驱动中性粒细胞外诱捕网形成以促进CD8+ T细胞耗竭，介导胃癌免疫治疗耐药

背景：胃癌对程序性细胞死亡蛋白-1（PD-1）抑制剂治疗的耐药性与免疫抑制性肿瘤微环境密切相关。然而，中性粒细胞在抗PD-1治疗耐药中的作用尚不清楚。方法：对接受抗PD-1治疗的晚期胃癌患者肿瘤样本进行单细胞RNA测序，以鉴定与中性粒细胞外诱捕网（NETs）相关的中性粒细胞亚群。利用多组学分析、流式细胞术、多重免疫荧光和体外共培养进行多层次实验验证。在YTN16肿瘤小鼠模型中评估了靶向NETs和CD8+ T细胞耗竭的治疗策略。结果：我们在抗PD-1治疗耐药的胃癌患者中发现了一个富含NETs的中性粒细胞亚群。该亚群以CD177为标志，并表现出较高的NETs释放潜力。胃癌患者外周血NETs水平和CD177+中性粒细胞比例可作为评估PD-1抑制剂疗效的标志物。此外，在胃癌中高表达并与CD177+中性粒细胞空间共定位的转化生长因子-β1（TGF-β1）可能通过Smad3-NFE2轴诱导中性粒细胞释放NETs。NETs通过激活MEK/ERK-c-Fos/JunB轴促进CD8+ T细胞耗竭，表现为PD-1/TIM3表达增加和干扰素-γ/肿瘤坏死因子-α分泌减少。体内实验证实，使用DNase I或TGF-β1抑制剂靶向抑制NETs形成可显著抑制肿瘤生长和CD8+ T细胞耗竭。值得注意的是，MEK抑制剂曲美替尼逆转了与CD8+ T细胞耗竭相关的免疫抑制微环境，并与抗PD-1疗法协同增强抗肿瘤疗效。结论：TGF-β1驱动CD177+中性粒细胞释放NETs，后者通过ERK-c-Fos-JunB通路诱导CD8+ T细胞耗竭，从而介导胃癌对抗PD-1治疗的耐药。此外，靶向NETs形成以及联合曲美替尼与PD-1抑制剂可显著逆转CD8+ T细胞耗竭，发挥协同抗肿瘤作用，为克服胃癌抗PD-1治疗耐药提供了潜在的治疗策略。