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lncRNA SNHG11通过激活Wnt/β-catenin通路和致癌性自噬促进胃癌进展
lncRNA SNHG11 Promotes Gastric Cancer Progression by Activating the Wnt/β-Catenin Pathway and Oncogenic Autophagy
摘要
长链非编码RNA在包括胃癌在内的癌症发展中受到广泛研究。致癌性自噬是癌细胞生存所必需的。本研究旨在探讨lncRNA SNHG11在胃癌中的调控作用。我们发现SNHG11在胃癌中上调，且其上调与患者不良预后相关。功能上，SNHG11加剧致癌性自噬，从而促进胃癌细胞的增殖、干性、迁移、侵袭和上皮-间质转化。机制上，SNHG11通过miR-483-3p/miR-1276转录后上调CTNNB1和ATG12，同时阻碍前体miR-483/miR-1276的加工。SNHG11通过与CUL4A相互作用诱导GSK-3β泛素化，进一步激活Wnt/β-catenin通路。有趣的是，SNHG11以依赖ATG12而非Wnt/β-catenin通路的方式调控自噬，但SNHG11通过这两条通路共同促进胃癌细胞的恶性行为。最后，研究表明TCF7L2转录诱导了胃癌细胞中SNHG11的上调。总之，我们揭示了SNHG11是胃癌中的一种致癌lncRNA，可能是一个有前景的胃癌预后和治疗靶点。
实验方法
产品清单
| 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|
| RPMI 1640培养基 | Gibco | -- |
| 胎牛血清 | Gibco | -- |
| DMEM培养基 | Gibco | -- |
| rtStar第一链cDNA合成试剂盒 | Arraystar | AS-FS-001 |
| Arraystar SYBR Green实时定量PCR预混液 | Arraystar | AS-MR-005 |
| Lipofectamine 3000转染试剂 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| TRIzol试剂 | Invitrogen | -- |
| EvoScript通用cDNA合成试剂 | Roche | -- |
| 罗氏LightCycler 480 PCR系统 | Roche | -- |
| TaqMan miRNA逆转录试剂盒 | Applied Biosystems | -- |
| TaqMan miRNA检测试剂 | Applied Biosystems | -- |
| RIPA裂解缓冲液 | Beyotime | -- |
| 聚偏二氟乙烯膜 | Millipore | -- |
| 增强化学发光试剂 | Pierce | -- |
| 细胞计数试剂盒-8 | Dojindo | -- |
| ELx800酶标仪 | BioTek | -- |
| 结晶紫 | Solarbio | G1062 |
| EdU标记/检测试剂盒 | Ribobio | -- |
| 超低吸附表面六孔培养板 | Corning Life Sciences | -- |
| DMEM/F12培养基 | Gibco | -- |
| 荧光显微镜 | Leica | -- |
| 荧光激活细胞分选流式细胞仪 | BD Biosciences | -- |
| CD133-藻红蛋白抗体 | Miltenyi Biotec | -- |
| 流式细胞仪 | BD Biosciences | -- |
| FlowJo软件 | BD Biosciences | -- |
| Transwell小室 | Millipore | -- |
| Matrigel基质胶 | Sigma-Aldrich | -- |
| 倒置显微镜 | Olympus | -- |
| 纤连蛋白 | Sigma | 10838039001 |
| 牛血清白蛋白 | Sigma | A7030 |
| 结晶紫 | Solarbio | G1062 |
| Olympus IX 71显微镜 | Olympus | -- |
| Image-Pro Plus软件 | -- | -- |
| QuantiGene ViewRNA miRNA原位杂交细胞检测试剂盒 | Affymetrix | -- |
| 荧光显微镜 | Leica | DMI4000B |
| GFP-mRFP-LC3腺病毒载体 | HanBio Technology | -- |
| 共聚焦激光扫描显微镜 | Zeiss | LSM 880 with Airyscan |
| pSV40-Renilla质粒 | Promega | E6911 |
| 双荧光素酶报告基因检测系统 | Promega | e1910 |
| MagnaChIP试剂盒 | Millipore | -- |
| Magna RIP试剂盒 | Millipore | -- |
| 生物素RNA标记混合物 | Roche | -- |
| T7 RNA聚合酶 | Roche | -- |
| 无RNase的DNase I | Roche | -- |
| 链霉亲和素琼脂糖珠 | Life Technologies | -- |
| SilverQuest银染试剂盒 | Thermo Fisher Scientific | LC6070 |
| LCMS-8060液相色谱-串联质谱仪 | Shimadzu | -- |
| Thermo Scientific Pierce经典免疫沉淀试剂盒 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| 蛋白A/G磁珠 | Life Technologies | -- |